Sinh học - Bài 21: Thu mẫu và ly trích tuyến trùng từ thực vật

Nội dung text: Sinh học - Bài 21: Thu mẫu và ly trích tuyến trùng từ thực vật

1. Bài 21: Thu mẫu và ly trích tuyến trùng từ thực vật
2. Materials required • Pan or tray • Wire mesh • Tissue paper, coffee filter • Squeeze bottle • 500 mesh sieve
3. Phương pháp thu mẫu
4. Sampling pattern for damaged area or infected patch in a crop.
5. Sampling pattern for individual tree or shrub.
6. Soil sampling pattern for row crops. • Figure 6. Soil sampling pattern for row crops.
7. Thu mẫu đất ngồi đồng • Độ sâu * 20 cm cho hầu hết các loại cây trồng * 20-100 cm cho cây đa niên, tùy tuổi cây, loại cây, * 30-45 cm ở những vùng nĩng và mùa hè khơ hạn
8. Số lượng mẫu cần thu * 10 mẫu cho 5m² * 20 cho 5m²-100m² * 30 for larger fields
9. Thời gian lấy mẫu • Trước khi trồng • Giữa mùa vụ • Khi thu hoạch
10. Để phân tích cho chính xác • Lấy mẫu đất + rễ: để cùng vào 1 túi • Nếu đất thu khơ, cần cho một ít nước để tạo ẩm độ cho đất • Cần trích tuyến trùng ngay sau khi thu mẫu, nếu khơng phải giữ mẫu ở 4-15°C, Tốt nhất= 10°C. • Khơng giữ mẫu lâu, phân tích mẫu càng sớm càng tốt
11. Phương pháp trích tuyến trùng từ đất và thực vật • Tùy thuộc loại tuyến trùng - Cách gây hại (nội, bán nội, ngoại, di động, bất động) - Kích thước cơ thể - Di chuyển: nhanh, chậm, ít, * Mỗi phương pháp đều cĩ ưu và khuyết điểm
12. Kỹ thuật trích tuyến trùng từ đất và thực vật Đất và thực vật • Baermann Funnel (Quặng Baermann) • Phương pháp lắng cặn và lọc của Cobb • Phương pháp lọc và ly tâm Riêng cho thực vật • Phương pháp ủ (trong nước) và lọc • Phương pháp xay và lọc
13. Baermann Funnel (Quặng Baermann) Nguyên tắc • Dựa trên sự di chuyển tích cực của tuyến trùng
14. Baermann Funnel set up Funnel Soil sample over wire mesh Clamp to hold funnel Rubber tubing Clamp Beaker
15. Incubate for 48 hours and collect the nematodes
16. Kỹ thuật trích tuyến trùng từ đất và thực vật • Phương pháp lắng cặn và lọc của Cobb
17. Sô A PHƯƠNGĐổ ngay vào Sô B PHÁP qua rây 1mm rây 1mm 10 lít 0.5 kg H O Nghiên cứu ở phòng thí nghiệm 2 đất Sô B 2 lít H2O Mẫu đất: Đất có sa cấu nặng, có nhiều hữu cơ Đất có sa cấu nhẹ, có ít hưũ cơ rây 100 m Trích tuyến trùng rây 45 m hoặc 50 m Sô C Đĩa Petri Beaker Bình tia Hình. Sơ đồ trích tuyến trùng từ đất.
18. Kỹ thuật trích tuyến trùng từ đất và thực vật • Phương pháp lọc và ly tâm
19. Kỹ thuật trích tuyến trùng từ đất và thực vật • Seinhorst cyst-elutriator
20. Kỹ thuật ly trích tuyến trùng đơn giản • Soil samples Baermann funnel Modified Baermann funnel • Root Samples Jar incubation and sieving Blending and sieving • Foliar samples Punching and incubating Scissors technique
21. Add the soil sample to the coffee filter or tissue paper
22. Place the sample on the funnel
23. Cover the tissue over the soil
24. Collect nematodes in a beaker
25. Ưu và giới hạn của phương pháp Baermann Ưu • Tuyến trùng khơng bị tổn thương • Mẩu sạch, dễ quan sát • Khơng cần phải lược qua rây • Đơn giản, rẽ tiền Hạn chế • Khơng phát hiện được những lồi ít hoặc khơng di động
26. Phương pháp Baermann cải tiến
27. Chuẩn bị rây
28. Để đất trên tờ giấy lọc
29. Để giấy lọc + đất vào trong rây
30. Cho nước vào rây
31. Để ở nhiệt độ trong phịng trong 3 ngày
32. Sau 3 ngày, lấy rây ra và giữ lại phần nước
33. Cho nước qua rây
34. Lấy tuyến trùng trên ray
35. Ưu điểm và giới hạn của Quặng Baermann Ưu • Tuyến trùng khơng bị tổn thương • Mẩu sạch, dễ quan sát • Khơng cần phải lược qua rây • Đơn giản, rẽ tiền Giới hạn • Thiếu oxygene • Khơng phát hiện được những lồi ít hoặc khơng di động
36. Ưu điểm và giới hạn của phương pháp lọc và ly tâm * Ưu Thu được hầu hết các loại tuyến trùng * Giới hạn Thiết bị đắc tiền + kinh nghiệm
37. Phương pháp ủ (trong nước) và lọc (Dựa trên nguyên tắc: Tuyến trùng cĩ khuynh hướng di chuyển ra khõi rễ và thực vật khi ở trong nước)
38. Phương pháp xay và lọc