Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học của một số dịch chiết từ nụ vối

Nội dung text: Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học của một số dịch chiết từ nụ vối

1. sau24giờuốngthuốcđạtýnghĩathốngkêsovớilôchứng(uốngnướccất)(p<0,05).Tuynhiên,lượng nướctiểuởcáclôchuộtnàyíthơncóýnghĩathốngkêsovớilôchuộtuốngFurosemide10mg/kgthểtrọng (p<0,05). V. KÉTLUẬN Tỷỉệphốihợp4phầncaođặcDiệphạchâuvà1phầnRâumèothểhiệnkhảnăngứcchếxanthinoxidase invitromạnhnhất. CaochiểtDiệphạchâu­Rấumèovớiliềuuống(100mgDHC+25mgRâumèo)/kg,cótácdụnghạaxít urictrênmôhnhtăngaxíturiccấpvàtăngaxíturickéodàivàsựphốihợpDiệphạchâuvớiRâumèotạo nênhiệuquảhạaxíturictốthơnsovớikhidùngriêngrẽtừngloạidượcliệu. CaochiếtDiệphạchâu­Râumèovớiỉiềuuống(100mgDHC+25mgRâumèo)/kgtbểhiệntácdụng lợitiểubắtđầuởgiờthứ4saukhiuốngthuốc. CaochiếtphốihợpDiệphạchâu­Râumèoíhểhiệnhoạttínhchổngoxyhóainvitro. TÀILIỆUTHAMKHẢO 1.BộYTế.ViệnDượcLiệu(2006),Phưngphápnghiêncứutácdụngdượclýcủathuốctừdượcthảo.Nhàxuất bảnKhoahọcvàKỹíhuật,tr.279­293. 2.LêThịMinhDung(2011),Nghiêncứutácdụnghạaxíturicmáucủacaochiếttừláđạibi,luậnvãnCaohọc Dược,ĐạihọcYDượcTp.HCM. 3. Mai Thanh Thi Nguyen,Suresh Awaie,Yasuhiro Tezuka,Liying Shi...(2005), “Hypouricemic Effects of Acacetinand4,5­O­DicaffeoyIquinicAxítMethyl Esteron SerumAxituricLevelsinPotassiumOxonat­ Pretreated Rats”,BiologycalandpharmacuticalBulltin,p2231­ 2234 4. Michael Antolovich, Paul D. Prenzler, Emilios Patsalides, Suzanne McDonald and Kevin Robards (2002), “Methodsfortestingantioxidantactivity”,Analyst,vol. 127,pp. 183­198. 5.NguyễnThùyDươngvàcộngsự(2011),“NghiêncứutácdụnghạaxíturichuyếtthanhcủaHythiêmtrênmô hnhgâytăngcấpaxíturicbàngkalioxonat”,TạpchíDượcliệu,tập16,(số1+2),tr.79­ 82. 6.PhạmThịHóa,BùiMỹLinh(2012),Khảosáttácdụnghahọc, độctínhcấpvàtácdụngợitiểucủacâydứa Caỉda(PandanuskaidaKurz)trênthựcnghiệm,đềtàicấpcơsở,ĐạihọcydượcTp.HCM. NGHIÊNCỨUCHIẾTTÁCHXÁCĐỊNHTHÀNHPHẦNHÓAHỌC CỦAMỘTSỐDỊCHCHIẾTTỪNVÓI ThS.TrầnThuHiền* Hư&ngdẫn:PGS.TS.ĐặngMinhNhật TỎ M TT CâyvốicótênkhoahọclàCỉistocaiyxoprcuỉatus,thuộchọSim,Myrtaceae.Trongnụvổichứanhiềuthànhphần hóahọccóhoạttínhsinhhọcđượcxácđịnhthuộcnhómAavonoiđ[4].Cáchợpchấtnàycóhoạttínhchốngoxyhóa,ức chếenzyra,kmhãmquátrnhpháttriểncửatểbàoungthư,Mặcdù nụvốicórấtnhiềucôngđụngtrongcuộcsống cũngnhưtrongyđượcnhưngởnướcta,nghiêncứunghiêncửusơbộvềthànhphầnhóahọctừnụvốicònhạnchế.Để đadạnghomvềnghiêncứuthànhphầnhóahọccủaloạicâynàytrêncácvùngmiềnkhácnhạunênchúngtôithựchiện đềtài“Nghiêncửuchiếttáchxácđịnhthànhphầnhahọccủamộtsổdịchchiếttừnụvối". Mụctiêu ­Nghiêncứuquytrìnhchiểtcáchợpchẩthahọctừnụvối. ­ Xácđinhthànhphầnhahọccadịchchiấtừnụvối. * ĐạihọcDuyTânĐàNăng * * ĐạihọcBáchkhoaĐàNăng 757
2. ­Thămdòhoạttínhsinhhọccùamộtsốdịchchiếttừnụvôi. -Phânlậpvàxácđịnhmộtsốcôngthứccấutạochínhtừnụvối. Đốitượngvàphươngpháp: ­Đốilượng:NụvốiđặtmuatạiBắcGiangvàđịnhdanhtạiViệnDượcliệu. ­Phuơngphápnghiêncứu: +Phươngphápchiếtsoxhletbằngcácdungmôin­hexan,ethanol. +Thửhoạttínhsinhhọccủamộtsốđịchchiểttừnụvối. +NghiêncứuđinhdanhthànhnhẩnTinahnrn'lamAlcAhrmX v««“ĩiíif U r ^ i z z tỉỉus.ỉỉ “Vỉi wViii.ỉiiy;ùv»*VHwiiCiuyuguiviiWiivL ỉrnnrr/íír>K k^n/TuuiigjjiiaiiUi/iiU /ir*V/ÍP4Ẩỉ uwiViJUOỈ VUI địchchiếtn­hexan,ethanoltuyệtđối. +Phânlậpvàxácđịnhcấutrúchóahọcchínhcủamộtsốdịchchiếttừnụvốibằngphươngphápphổ13c­NMR,*H ­NMR,DEPT,HMBC,HSQC. ­Kếtquảvàkếtluận: Đãxácđịnhđượctrongthànhphầncácdịchchiếttừnụvốicó25cấutửđãđượcđịnhđanhbằngphươngphápGC­ MS:Sterol,dirterpen(nhómtocopherol),acidhữucơ,andehit,dẫnxuấtphenol,ester. Thửhoạttínhkhángsinhchothấycaochiếtn­hexanvàcaochiếtethanoltuyệtđốicủanụvổicóhoạttínhkhángcác chủngcầukhuângram(+) (Staphylococcusaurus). Dịchchiếtn­hexanngoàiracònthểhiệnhoạttínhvớibacillus subtỉỉis.Dịchchiétethanolcònthểhiệnkhảnăngchốngoxyhóavới EC50= 105,77 lig/ml.Phânlập đượcchấttinh khiếtthuộc khungflavonoid từcao n­hexan có tênkhoahọc 2 \ 4’ ­ dihydroxy­ 6’ ­methoxy ­ 3’, 5’ ”dimethyl chalcone2\4’­đihydroxy­6’­meíhoxy­3’,5’­dimethylchalcone. *Từkhóa:Nụvối;Địchchiết;Thànhphầnhóahọc D eterm inationo fckem icaỉcơm tửueỉítso fextractsfrom 3uđso fcỉeừtocaỊyxỡpercuỉatus Summary Voi, scientificnameis Clistocalyxoprcuỉatus,belongtoSim , Myrtaceae . Leaves andshoots haveapleasant aroma[13.Inthebud,manychemicalcompositionofbiologicalactivityhasbeenidentifiedflavonoidgroup[4].These compoundshaveantioxidantactivity,inhibitionofenzymes,inhibitthegrowthofcancercells.Althoughtherearemany budsofClistocalyxoprculatusadvantageinlifeaswell asinmedicinebutinourcountrythereareveryfewstudies onthepreliminarystudyofthechemicalcompositionbudsofClistocalyxoprculatuscollected. Formoreaboutthe study ofdiverse chemical composition ofplants in different regions, we carried out the project “Dtrmination of chmicalconstituntsofxtractsfromthbudsClistocalyxoprculatus” MaterialsandMethod ­Material: BudsofcleistocaiyxoperculatuswasplacedinBacGiangandidentifiedatInstituteofPharmaceutical products. Mthod -TostudytheprocessofchemicalcompoundsextractedfrombudsofClistocalyxoprculatus. -ToidentifythechcmicalcompositionofextractsfrombudsofClistocalyxoprculatus. -ToexplorethebiologicalactivityofextractsfromsomebudsofClistocalyxoprculatus -TosurveyisolatedandidentifysomethemainkeyformulafromthebudsofClistocalyxoprculatus Resultsandconclusion:Chemical compoundsofextractsfromthebudsofClistocalyxoprculatusin Bacgiang wereanalyzedbythegaschromatography­massspectromctry(GC­MS),25compoundswereidentifiedsuchas:sterol, đirterpen(nhómtocopherol),organicacid,andehit,derivationofphenol,ester. Theresultsofextractn­hexaneandetanolhavebeenshowedtheantibacterialactivitiesofmicroorganismsgram(+) Staphylococcusaurus at IC50 which has the value atextractn­hexane 2.42 Jig/ml, etanol 76.44 jxg/ml. Which has extractn­hexaneantibacterial activitythe microorganismsgram (­f)BacillussubtilisatIC50thatvalues87.55 Jig/ml. BesidesantimicrobialantioxidantactivitywhichhasextractedetanolfrombudsClistocalyxoprculatushastheability ofantioxidantingatEC50=105.77Jig/ml. 758
3. The result of isolation by using the column chromatography and the analysis of structure by the modern physicalmethodnamed 1H­NMR, 13C­NMR,HSQC,HMBCvà DepT.Thatis2,4’­dihydroxy­6’“methoxy­3 \ 5’­dimethylchalcone. *Keywords:BudofClistocalyxoprculatus;Extraction;Chemicalconstituents. I.Đ Ặ T V Ấ N Đ Ẻ CâyVốicótênkhoahọclàClỉstocalyxoprculatus,thuộchọSim,Myrtaceae.Lávàcànhnoncómùi thơmdễchịu[1].vốiđượctrồngrộngrãiởnhiềutỉnhViệtNamđểlấylávànụnấunướcuống,sắclấynước chữacácbệnhngoàiđanhưchốcđầu,ghẻlở[2].Dịchnướcvốicòncótácdụnglênvikhuẩnđườngmột,E. coỉi,cácvikhuẩngram(+)gâybệnhviêmda[3],bảovệsựlipidhóacủatếbàogan[7].Dịchchiếtcủanụ Vốicũngcókhảnăngđiềutrịtiểuđườngthôngquaứcchếenzymea­gỉucosidase,giảmiượngđườnghuyết trênchuột [6]. Rấtnhiều thành phần hóahọc cókhungchalcone vàchalconechứađường glucosehoặc saccarosethuộcvàocáchợpchấtdạngflavonoidslàthànhphầnhóahọcchính,đãđượcchiếtratừnụvối [4].Chúngcòncókhảnăngchốngoxyhóavàứcchếenzymecholinesteraselàmộtloạienzymegâyrabệnh mấttrínhớ,Alzheimer[4,5].Mặcdùnụvốicórấtnhiềucôngdụngtrongcuộcsốngcũngnhưtrongydược, tuynhiênởnướcíacôngtrnhnghiêncứunghiêncứusơbộvềthànhphầnhóahọctừnụvốithuháiởNam ĐịnhvàNghệAncònhạnchế.Đểđadạnghơnvềnghiêncứuthànhphầnhóahọccủaloạicâynàytrêncác vùngmiềnkhácnhaunênchúngtôithựchiệnđềtài“Nghiêncứuchiếttáchxácđịnhthànhphầnhóahọccủa mộtsốdịchchiếttừnụvối”nhằmmụctiêu -Nghiêncứuquitrìnhchiếtcáchợpchầhóahọctitnụvối. -Xácđịnhthànhphầnhahọccủadịchchiếttừnụvối. -Thămdòhoạttínhsinhhọccửamộtsốdịchchiểttừnụvối. -Khảosátphânlộpvàxácđịnhmộtsểcôngthứccấutạochínhtừnụvối. II. ĐỐITƯỢNGVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNcứu 2.1.Đốitượngnghiêncứu NụVốiđượcđặtmuatạiBắcGiangvàđịnhdanhtạiViệnDượcliệu. 2.2.Phươngphápnghiêncứu 2.2.1.Chiếtbngcácdungmôihữucơ BộtnụVốisaukhiloạitạpbằngetedầuhỏa,tiếnhànhchiếtsoxhlet30gbộtnụvốikhôtrongđungmôi n­hexanở69oCvớithờigianchiết6giờthuđượcdịchchiếtvàbãn­hexan.Dùngbãn­hexanchiếtsoxhlet trongdungmôietanoltuyệtđốiở78oCvớithờigian8giờ.Cácđịchchiếtthuđượcỉàmbayhơidungmôi thuđượccaochiết. Cáccaochiếtđượcđịnhdanhthànhphầnhóahọcbằngphươngphápsắckýkhíkhốiphổ(GC­MS).Cô cạnmộtphầndịchchiếtn­hexanvàdịchchiếtetanoltuyệtđốithuđượccaochiếttươngứngđểthửhoạttính khángsinhvàhoạttínhchốngoxyhóa. 2.2.2.Địnhdanhthànhphnhóahọccácdịchchiết ThànhphầnhoáhọcdịchchiếttừnụvốiđượcxácđịnhbằnghệthốngsắckýkhíkhốiphổGC/MS 7890A/5975C,Agilenttechnology,Mỹ.CộttáchmaoquảnHP­5MS(5% PhenylMethylSilox): 30mX 250pm X0,25Jim. Chươngtrnh nhiệtđộ: bắtđầutù70°c, tăng 20°c/phútđến 160°c,sauđótăng l°c/phútđén 180°c, tiếptụctăng30°c/phútđến250°c,cuốicùngtăng3°c/phútđến290°ckếtthúcquátrnh.Nhỉệtđộinjector 300°C;nhiệtđộdetector280°c,khímangHe(20ml/phủtsau2phút);ápsuất: 8.1225psi;thểtíchbơm mẫu1|il, tỷệchiadòng10:1,tốcđộđòngchia9.4248ml/phút. Cácthôngsốvậnhànhkhốiphổ(MS)làđiệnthếionhóa70eV;nhiệtđộnguồnion230°c,khoảng khốilượngm/z30­600. 759
4. CácthànhphầndịchchiếttừnụvốiđượcxácđịnhbằngcáchsosánhcácdữkiệnphổMScủachóngvới phổchuẩnđãđượccôngbốcótrongthưviệnNIST. 2.3.Thửhoạttínhsinhhọc Cáccaochiếen­hexanvàethanolđượcthửhoạttínhkhángsinhvàhoạttínhchốngoxyhóatạiPhòng Hóasinhứngdụng­ViệnHóahọc. 2.4.Phânlập,tínhchếxácđịnhcutrúchóahọc Từcaon­hexanchavcộtsẳc vớihệdungĩpninhađộr»ơJàn­hexap­e>'vfí'Yí:‘*a*=5Q*t TknAĩrrtng7Ang thểtíchhứng 10mi/ống.Saukhitiếnhànhsắckýlópmỏng(SKLM),nhữngốnggiốngnhauđượcgộp chungthànhmộtsốphânđoạn.Kêtquảthuđược6phânđoạnđượcđánhsốnhưsau:AIss(1­ 18),A2= (19­34),A3=(35­47),A4=(48­59),A5=(60­75),A6=(76­87).SaukhitiếnhànhSKLMở6phân đoạntrên,chứngtôinhậnthấyrằngởphânđoạnA3cósựtáchlớprõràng,vàítlẫntạpchấtnhất(Rf=0,6) nêntiếnhànhcôquaychânkhôngdướiápsuấtgiảm,nhiệtđộdưới50oC,thuđượcchấtrắntinhkhiếtH2. Sauđótiếnhànhđophổ13C­NMR, 1IĨ­NMR,DEP,HMBCtạiViệnHóahọc,ViệnHànlâmKhoahọcvà CôngnghệViệtNam, 18HoàngQuốcViệc,c ầ u Giấy­HàNội. ra.KỂTQUẢNGHIÊNc ứ u VÀBÀNLUẬN 3.1.Địnhdanhthànhphndịchchiếtbộtnụv ếỉbngcácdungmôikhácnhau Bằngphươngphápsắckýkhíkhốiphổ(GC­MS),đăxácđịnhđượcthànhphầnhoáhọctrongđịchchiết n­hexane(bảngỉ),dịchchiếtetanoltuyệtđối(bảng2). Bảng1.Thànhphầnđịnhđanhdịchchiếtn­hexancủanụvối Thờigianlưu Diệntíchpíc STT TẾU (phút) (%) 4.705 0,44 Benzaldehyde 2 6.202 0,60 Acetophenone 3 7.693 0,49 Benzoicacid 4 8,302 0,22 Bicyco[3.1.1]hept­ 3­ en­ 2­one,4,6,6­ưimethyl (Is) 5 10.310 0,37 3­ buten­ 2­one,4­ phenyl­,(E) 6 11.237 0,30 Trans­cinnamicacid 7 11.875 0,46 Naphthalene, 1, 2, 3, 4, 4a, 5, 6, 8a­­octahydro“ 7­ methyl­ 4­ methylene­ 1­(1­methylethyl)­ 8 12.350 0,40 Naphthalene, Ỉ,2,4af5,6,8a­ hexahydro­4,7­ dimethyl~1­(1­ methylethyl)­ 9 14.241 0,74 Naphthalene,1 ,6 ­ dimethyl­ 4­(1­methylethýl)­ 10 16.869 0,46 Hexadecanoicacid,methylester il 17.421 6,88 N­hexadecanoicacid 12 19.695 9,74 Cis­ 7­ dodccen­ 1­ylacetate 13 36.892 0,83 Gama­tocopherol 14 42.068 7,77 Gama­sitosterol Dựavàobảng1nhậnthấyvớidungmôin­hexanđãđịnhdanhđược 14cẩutử.cấutửcóhàmlượng lớnhom 5% n ­ hexadecanoic aciđ(6,88%); gama­ sitosterol (7,77 %); cis­7­ dodecen­l­yl axetat 760
5. (9,74%).Cấutửcóhàmlượng 0,5%gama­tocopherol(0,83%);naphthalene, l,6­dimethyl­4­ (1­methylethyl)­ (0,74%).Cáccấutửcònlại đềucóhàmlượngthấpvàcáchợpchấtkháctạmthời chưathểđịnhdanh.Mộtsốcấutửcóhàmlượnglớncóhoạttínhsinhhọcgama­sitosterol(7,77%);Gama­ tocopheroi(0,83%):MộtdạngcủavitaminE,ỉàmtăngkhảnăngmiễnđịch,thúcđẩyquátrnhtáitạoda,cải thiệnsứckhỏeđôimắt,bảovệcáctếbàolipitcủacơthểtrướcquátrnhoxyhóavàsựtấncôngcủagốctựdo. Bảng2.Thànhphầnđịnhdánhdịchchiếtetanoltuyệtđốicủanụvối STT Thòigianlưu(phút) Diệntíchpíc(% ) Tên 1 4.742 1,84 Benzaldehyd 2 6.224 0,47 Acetophenone 3 7.659 1,57 Benzoicacid 4 10.314 0,29 3­buten 2­one,4—phenyl (E)­ 5 ỉ1.245 4,23 Trans­Cinnamicacid 6 11.685 0,78 2­propenoicacid,3­pheny ethylester 7 17.3Í6 5,09 N­hexadecanoicacid 8 17.698 0,61 N­hexadecanoicacid,ethylester 9 19.549 3,76 9 ,12­octadecadienoicacid(z,z)­ 10 19.6Ỉ0 2,85 Oleicacid 11 41.991 5,57 Beta­sitosterol PhântíchGC­MSđãđịnhdanhđược 11 cấutửtrongđịchchiếtetanoltuyệtđốivàmộtsốcấutửkhác chưađịnhđanhđược.Cácacidhữucơchiếmhàmlượngcaon­hexadecanoicacid(5,09%);Trans­Cinnamic acid(4,23%);9,12­octađecadienoicacid(z,z­)(3,76%);Oleicacid(2,85%);Benzoicacid(1,57%);ngoàira trongđịchchiếtetanoỉcóxuấthiệnbeta­sitosterol(5,57%)cóhoạttínhsinhhọc:giảmmỡmáu,điềuhòa chuyểnhóacholesteroltrongmáu.Nhậnthấytrongdungmôikémphâncựcnhưn­hexankhôngthấyxuất hiệnbeta­sitosterol màchỉ xuấthiện gama­sitosteroỉ. Điều nàycũng khuyến cáo khi cần phânlậpbeta­ sitosterolthnênchọnphânlậptrongcácdungmôiphâncựctốt. 3.3.Kếtquảthửhoạitínhsinhhọc 3.3.1.Kếtquảỉhửhoạttínhkhángsinh Bảng3.Kếtquảthửhoạttínhkhángsinhdịchchiếtn­hexan,etanoltuyệtđốicùanụvối Nồngđộứcchế50%sựpháttriểncãavisinhvậtvànấm Vỉsinhvậtvànấmkiểmđịnh kiểmđịnh­ĨC50(lig/ml) n­hexan Etanoltuyệtđối Staphylococcusaurus 2,42 76,44 Gram(+) Bacillussubtilis 87,55 >128 Lactobacillusntrica >128 >128 Salmonllantrica >128 >128 Gram(­) Eschrichiacoli >128 >128 Psudomonasaruginosa >128 >128 Nấm Candidaalbican >128 >128 761
6. Dịchchiếtn­hexanvàetanoltuyệtđốitừnụYốicóthểhiệnhoạttínhứcchếsựpháttriểncùachủngcầu khuẩngram(+) staphylococcusaurus(mộtloại cầu khuẩn gâymùcácvếtthương, vếtbỏng, gâyviêm họng,nhiễmtrùngcómủtrêndavàcáccơquannộitạng)vớiIC50­ 2,42Jfg/ml,IC50=76,44 Dịch chiếtn­hexanngoàiracònthểhiệnhoạttínhvới bacillussubtilismộtloạisinhbàotử,thườngkhônggây bệnh)vớiIC50=ng/ml.KhôngthểhiệnhoạttínhđốivớivisinhvậtvànấmcònỉạivớiIC50 <128fig/ml. Ketquảthửnghiệmgópphầnchứngminhchoviệcsửđụngnụvốitrongmộtsốbàithuốcchữabệnhdân gianhayyhọccổtruyềnvềtrịmộtsốbệnhngoàida,chốcđầu,lởghẻ..­Đâylàmộtthôngtinđểngườidân cóthểyêntâmsửdụngnụvốiđểchữabệnh. 3.3.2.KếtquảthửhoạttínhchốngoxyhóaDPPH Bảng4.KếtquảthửhoạttínhchốngoxyhóaĐPPHdịchchiếtn­hexan,etanoltuyệtđốicủanụvối. STT Kýhiệumẫu ECso(jig/ml) 1 Dịchchiếtnụvổin­hexan >128 3 Dịchchiếtnụvốietanoltuyệtđối 105,77 Thamkhảo Resveratrol 8,3 DịchchiếtnụvốitrongdungmôietanoltuyệtđổicóthểhiệnkhảnăngchốngoxyhóavớiEC50=105,77 fig/ml.Đốivớidịchchiếtnụvốitrongdungmôin­hexanvàdiclometankhôngthấythểhiệnkhảnăngchổng oxyhóa.Mộtphầnnàocũngchứngminhđượccácbàihọckinhnghiệmđangianvềkhảnăngchốngoxyhóa củanụVối. 3.3.3.Kếtquảphânlập,tinhchếxácđịnhcutrúchóahọccủachtH2 HIEN­H2­CDC13­C13CPD NAMECurrant OnCM r«ramntnrA l>h0CBXPNO N 0 2 1 — AcqtanU on ParAm^Ci bẠCeT im e aoậiĐÌKỆ 1 C . l ữ HỉOltttDINSTRUM i>mmMuieVnũẽĩ npocc *>ULÍ>ROO z a r r 3 0 •rộ 65 &3 Ạ tOLVBNT CDCii N S 26 0 3 2 FionisoSWH Ji44t.S4i 0.4­7903* : HCAO 1.0420803 337C© : ụỵ.n w Ì&6,00 .9 0 Ũ : - vịL>ỉ 2 .0 0 0 0 0 0 0 0 ứiiƯUUT/V 0.0*000000 1. ; MCWKKHCRKST 0.0500000 ò.©0000000 « OWAMtflJJ, M _____ N UG 1 1 3 c *'L1ri h.aoo.00. • A P O I ĩ7.y>,ỉ /itizza ị C H .M W K L t'2 CI>DPRO£ W«tr.61Ĩ( PCPDÍt 00.00 ' M.15V l Ẳ z Í2.ÕÒ. 1 6 . O i ! SP 07. 500.132000* I V2— S I Procoooma 3 S7 C Ổ SF 155ÍÍ.7S77897 1 J.PS S B 1­00; 0 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 ’ppni Hnh1.Phổ13c­NMRcủachấtH2 Phântíchphổ13C­NMR(hnh3.1)nhậnthấycóxuấthiệntínhiệucủa18carbon( trongđócóhaicacbon cócùngđộđịchchuyển)kếthọpphổDEPT(hnh3.2)chothấyH2có2nhón>CH3,1nhóm­OCH3,7nhóm >c=,7nhóm=CH 1 nhóm >c =o. 762
7. HIBtí­H2—CDCl3—Cl3CPD&DBPT HĨEN-H2-CĐCÌ3-1B DSPT3Ũ ssssssaaiss SSSĨSĨSSSIỈSSÌSSSSI I I--------- ---------r I - I"" ......r.....:• -T- I--------- ---------11 . r ~ r ! I 1 111 Hi H4 111 !U it ut M IM 1« It It « 19 It It BEPT135 CHCH3 1 1 1 ...... ........................... 1.. J 0)2 C13CPD 1J 11 u 12 11 10 5 Jwk U1 111 i í >19 ISO 111 111 115 i i n I I I I 19 is u ÌÌ it 'Ù Hnh2.Phổ13c­NMRcủachấtH2 Hnh3.Phổ'H ­NMRcủachấtH2 Phầntíchphổ'H ­NMR(Sppm, 500MHz)(hnh3)củachấtH2tanhậnthấy: 4­CÓhaimũiởs=2.130(s) xuấthiệntínhiệu3protonvà2.153(s)xuấthiệntínhiệu3protonchứngtỏ đâylàcácprotongắnvàonhóm ­CH3,cómộtmũiởỗ­ 3.659(s)là3proton ởcùngmộtnhóm­OCH3,tại 5=7.41(m)thấyxuấthiệntínhiệu3protonchứngtỏphảicó3nhóm­CHvàthuộcvòngthơm,dẫnđến trênphổ 13c­ NMRphảicóhaicacbontrùngnhau,tại s=7,64(d)thấyxuấthiện2tínhiệuprotonđâycũng là2nhóm­ CHcủavòngthơm,chứngtỏcacbonsổ2vàsổ6sẽtrùngnhau,tại 5=13.594(s)thấyxuất hiện1tínhiệuproton,chứngtỏđâylànhóm­ OH. Hnh4.PhổHMBCcủachấtH2 Hnh5.HSQCcủachấtH2 DựavàophổHMBCởhình4tanhậnthấychothấycósựtương tác xa giữaHvàc tạicácvịtrí c mà Hcóthêtươngtác:H2—>C 4, cp,H3 Ci,Ca,C5 ,H4 —>C2,Cfi,H5—>Cị,C3,C5 ,Hg—>C4,Cị ,H2 —> C í, C2, C3, H3—> C 2 , C3*, C4, H5’ > C4, C5’, Ce', Hfi > , H > Ci, cp, Cco, Hp c , C2, Ce, Cc^o- Hnh5tanhậnthấycósựtươngtácgầngiữac vàHtrongnhóm­ CHở vịtrícacbonsố2,3 , 4 , 5 ,6 ,a,Ị3và nhóm­ CH3ở vịtrí3 \5’vànhóm­ OCH3ởvịtrí6’.TạivịtríCjkhôngxảyrasựtươngtác.Điềunàygóp phầnchứngminhthêmvềcôngthứccấutạocủaH2. 763
8. Quaphổ13c­NMR,*H­NMR,PhổDEPT,phổHMBC,phổHSQCsosánhvớitàiliệuthamkhảo[8]ta kếtluậnđượcchấtH2ỉà2 \4’­ dihyđroxy­ 6’­ methoxy­ 3’,5’­ dimethylchalcone.Làchấtcókhả năngửcchếtébàoungthư. Ò H Ồ 2 \4’­dihydroxy­6’­ methoxy­3’,5’­ dimethylchalcone IV.KẾTLUẬN ­Gópphầnđịnhđanhxácđịnhcácthànhphầntrongdịchchiếtnụvối.Đãxácđịnhđượctrongthành phầncácdịchchiếtcó25cấutửđãđượcđịnhđanhbằngphươngphápGC­MSgồmsterol,đirterpen(nhóm tocopherol),acidhữucơ,anđehit,dẫnxuấtphenol,ester.Trongđótrongđungmôietanoỉcóxuấthiệnbeta­ sitosterol(sterol)cóhoạttínhsinhhọccaochiếm5,57%. ­Thămdòt á c dụngdượclýcùamộtsốdịchchiếttừnụvối.Thửhoạttínhkhángsinhchothấycaochiết n­hexan vàcao chiết etanol tuyệt đối của nụ vối có hoạt tính kháng các chủng cầu khuẩn gram(+) (Staphylococcusaurus)vớiIC50=2,42Ịig/ml,IC50=76,44Jig/ml.Dịchchiếtn­hexanngoàiracònthểhiện hoạttínhvớibacillussubtilismộtloạisinhbàotử,thườngkhônggâybệnh)vớiIC50 = 87,55 ịxg/ml.không thấythểhiệnhoạttínhvớichủngvisinhvậtgram(­)vànấmCandidaalbicanờnồngđộnhỏhơn 128Ịig/ml. Thửhoạttínhchốngoxyhóathdịchchiếtnụvốitrongdungmôietanolcóthểhiệnkhảnăngchốngoxy hóavớiEC50= 105,77fxg/ml,còndịchchiếtn­hexankhôngthểhiệnhoạttính. ­Phânlậpđược1chấttinhkhiếtcókhungflavonoidcókhảnăngứcchếtếbàoungthưtừcaon­hexari Ó H Ỏ 2%4’­ đihydroxy­ 6’­ m ethoxy­3’,5’­ dimethylchalcone TÀILIỆUTHAMKHẢO 1.VõVãnChi(2012).TừđiểncâythuốcViệtNam,NhàxuấtbảnYhọc.tr.l186­1188. 2.ĐỗTấtLợỉ.NhữngcâythuốcvàvịthuốcViệtNam.NhàxuấtbảnYhọc,2004,tr.423­424. 3.NguyễnĐứcMinh(1975).TínhkhángkhuẩncủacâythuốcViệtNam,NhàxuấtbảnYhọc. 4.Byung­SunMin,CaoVanThu,NguyenTienĐạt,NguyenHaiĐang,Han­Sujang,TranManhHung(2008). AntioxiđativeflavonoidsfromCleistocalysBubs,publicationcollection,Tr. 1725­1728. 5.Byung­SunMin,ToDaoCuong,loonSeokLee,MiheeWoo,TranManhHung(2010),Cholinesteraseinhibitors fromCleistocalyxoperculatusbuds,ArchPharmRes,33(10),pp.1665­1670. 6. TruongTuyet Mai, Nguyen Van Chuyen (2007). Anti­hyperglycemic activity ofan aqueous extractfrom flowerbubsofcleistocalyxoperculatus(roxb.)MerrandPerry,Biosci,Biotechnol.Biochem,71(1),pp.69­76. 7.WooAY,WayeMM,KwanHS,ChanMC,ChauCF,ChengCH(2002).InhibitionofAtpasesbyCleistocalyx operculatus,Apossiblemechanismforthecardiotonicactionsoftheherb,Vasepharmacol,38,pp.163­168. 9. Manar M. Salem and Karl A. Werbovetz (2005). Antiprotozal compounds from psorothamnus polydenius, j.Nat.Prod.68,pp.108­1n . 764