Nghiên cứu bào chế viên nang cứng bảo nhãn khang dưỡng huyết và thử độc tính cấp của chế phẩm

Nội dung text: Nghiên cứu bào chế viên nang cứng bảo nhãn khang dưỡng huyết và thử độc tính cấp của chế phẩm

1. TÀ ILIỆU THAM KHẢO 1.ĐỗTấtLọi(1999),NhữngcâythuốcvàvịthuốcViệtNam,NXBYhọc,tr.844­846. 2.ChenH.J.,etal.(2010), “Mastcelldependentallergicresponsesareinhibitedbyethanolicextractofadlaytesta”, JournalofAgriculturaland FoodChmistry,58(4),pp.2596­2601. 3.CoeFredricL­,etal. "Pathologyandứeatmentofkidneystone",Mdicalprogrss,VOỈ327,pp. 1141­1150. 4.Gohel Wongs.p. (2006),“Chineseherbalmedicinesandtheirefficacyintreatingrenalstones”,Urology Rsarch,34,pp.365­372. 5. Jaganathan KS, et al. (2013), “Events associated with apoptotic effect ofp ­Coumaric acid in HCT­15 colon cancercells”,WorldJournalGastrontrol21,pp.7726­7734. 6.KaradiVR,etal (2006). “EffectofMoringaolifraLam.root­woodonethyleneglycolinducedurolithiasisin rats”,JournalofEthnopharmacology105pp.306­311. 7.M.Beghalia,etal.(2008),“InhibitionofcanxiumoxalatemonohydratecrystalgrowthusingAlgerianmedicinal plants”,Journalofmdicinalplantsrsarch,pp.66­70. 8.TakahashiH.,etal.(1999),“CoumaroyltriterpenesfromCasuarinaquistifolid”,Phytochmmistry,51,pp.543­550. NGHIÊNc ứ ư BÀOCHỂVIÊNNANGCÚNGBẢONHÃNKHANGDƯỠNGHUYÉT VÀTHĐỘCTÍNHCÁPCỦACHỂPHẢM ThS.NguyễnThịKimOanh*;ThS.KkểngThịHoa*;ThS.ĐặngThuHằng* Hưởngdẫn:PGS.TS.HoàngNăngTrọng* TÓM TẲT ViênnangcứngBảo nhãnkhangdưỡnghuyếtchứa98%caochiếtcủa 14vịdượcliệuvớitádượcthíchhợp.Hỗn hợpbộtđượcđóngvàonangsố0,khốilượngtrungbnhmộtnangià590mg,thíchhợpchoviệcchialiềukhisửđụng. Sảnphẩmđượcnghiêncứathửđộctínhcấpvàxácđịnhliềuantoàn.KếtquảchothấykhôngxácđịnhđượcLD50 trênđộngvậtthựcnghiệm,sànphẩmantoànvàliềutươngđốiantoànlàDs=0,43gam/kgchuột. *Từkhóa:Viênnangcống;Bảonhãnkhangdưỡnghuyết;Độctínhcấp. PreparationofhardcapsuleBaonhankhangđuonghuyetanddeterminationofits acutetoxicityinapilotstudy Sum mary HardcapsuleBaonhankhangduonghuytincludes98%ofextractfrom14herbalsand compatibleexcipients.Mixed powderisfilledintothecapsulenumber0,meanweightof590mg. Thisproductisappropriatefordivideddoses. Thestudywasconductedtoassesstheacutetoxicity(LD)anddeterminesafetyofdosage.Theresultshowedthat noLD50wasobservedonexperimentalanimalsandtherelativesafetywasDs=0.43gram/kgweight. *Keyword:Hardcapsule;Baonhankhangduonghuyet;Acutetoxicity. I.Đ ẶTV Ấ NĐÈ Ngàynay,tổnthươnghắc­võngmạcđãtrởthànhnguyênnhânphổbiếngâygiảmthịlựcvàmùlòa,đặc biệtởnhữngngườicaotuổi.Việcđiềutrịtổnthươngvàphụchồithịlựcchobệnhnhâncòngặpnhiềukhó khănvcầnđiêutrịtoànthântrongthờigiankéodài. * ĐợihọcYDượcTháiBình 522
2. Hiệnnay,trênthịtrườngcórấtnhiềusảnphẩmgiúpbảovệmắt,nhằmnângcaovàcảithiệnchứcnăng sinhlýcủamắt,gópphầnphụcvụnhucầuphòngvàđiềutrịcácbệnhvềvõngmạc. Đểgópphầntạoramộtsảnphẩmmớivừaantoàn,hiệuquảlại tiệnđụngmàvẫngiữnguyênđượctác dụngcủabàithuốcyhọccổtruyền,chúngtôitiếnhànhđềtàinàynhằm: “XâydựngđượcquytrìnhbàochếviênnangcứngBảonhãnkhangdưỡnghuyết. -Xácđịnhđượcđộctínhcấp(LĐ)củachếphẩm . n .ĐÓITƯỢNGVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNc ứ u 2.1.Đổitượngnghiêncứu ­Cácđượcliệucótrongcôngthức ­Cáctáđượcdùngchothuốcnangcứng ­Kỹthuậtsảnxuấtthuốcnangcứng ~Độngvậtnghiêncứu: 80chuộtnhắttrắngchủngSwissđápứngcáctiêuchuẩnnghiêncứutrọnglượng từ18­22gkhôngphânbiệtđựccái,khôngchửa. 2.2.ThMgiannghiêncứu Từtháng10­2013đến 1­2014. 2.3.Địađiểmnghiêncứu NghiêncứuđượcthựchiệntạiBộMônBàochế­Côngnghiệpdược­KhoaDược­TrườngĐạihọc Y DưạcTháiBnh. 2.4.Nguyênvậtliệu,thiếtbị 2.4.1.Nguyênvậtliệu Cácdượcliệuctrongcôngthúc:Xuyênkhung,Đươngquy,Bạchthuợc,Sinhđịa,Hạkhôthảo,Ngưutất, Phòngphong,Kimngânhoa,Mẩuđơnb,Camthảo,Trimẫu,Cúchoa,Xatiềntử,Hoàngliên.Đạttheotiêu chuẩnDượcđiểnViệtNam4­2010. Cáctádược ­Lactose(DĐVN4­2010),calcicarbonat(DĐVN4­2010),Talc(DĐVN4­2010),Nipagin(TCCS),nước tinhkhiết(DĐVN4­2010),vỏnangsốo (TCCS),lọnhựa,nútnắp,nhãn(TCCS). 2.4.2.Thiếtbị »Thiếtbịđểbàochếnang:Cácdụngcụthínghiệmbằnginox,thủytinhchịunhiệt,râycáccỡ,khaysấy, cốichàysứ,thùngnấucao,nồicáchthủy,tủlạnh,máyđóngnangcứngbántựđộngmodelDTi­c,tủsấy M O V ­112. ­Thiếtbịđểthửđộctính:CânđiệntửAND­GF­300,kimđầutù,methylđỏ,phòngnuôiđộngvậtthực nghiệm:nền,trần, vách,khoảngkhôngtrongphòng,đụngcụnuôi:kệnuôi,lồng,nắp,chaiọđựngnước uông,quạt,hệthốngđiềuhòa;hệthốngsấytrẩuvôtrùng,hệthốngnước:bnhchứanước,máylọcnước,các vậtdụng,phươngtiệnvậnchuyểnravàophòngnuôi:xe,kệđẩy,khuvựcbãoquảnthứcăn:Thứcăncho chuộttừViệnVệsinhdịchtễTW. 2.5.Phươngphápnghiêncún 2.5.1. Phươngphápbàochếcaodượcliệu[6,9] Cónhiềuphươngphápbàochếcaođượcliệu,mỗiphươngphápcónhữngunnhượcđiểm,kỹÈhuậttiến hànhriêngcăncứvàođặcđiểmdượcliệuvàhạchtoánkinhtế.Quátrnhđiềuchếcaogồm4bước: 523
3. +Điềuchévdịchchiết. +Loạitạpchấttrongđịchchiết. +Côđặc,sấykhô. +Hoànchỉnhchếphẩm. Chóngtôichọnphươngphápđiềuchếdịchchiếtbằngcáchnấuvớinướcvphùhợpvớiđặctínhcủacác đượcliệucótrongcôngthức,hơnnữacáchlàmtươngđốiđơngiản,chiphíhợplý. Mỗilôgồm14dượcliệuđãđạttiêuchuẩn,nấuliêntụctrongthờigian3giờ.Đủthờigian,rútdịchchiết, tiếptụcỉằm3lầnđượccácđịchchiết1,2,3.Bỏbã. ­Loạitạp, côvàsấycao Côriêngcácdịchchiếttrênnồicáchthủyởnhiệtđộkhoảng70­80°c,khithểchấtcácdịchchiếtgần giốngnhau,gộp3dịchchiếtlại.Loạitạpbằngcáchđểlắngqua48giờ,gạnbỏcặn.Dịchchiếttrongđượccô chungbằngcáchthủychođếnkhithuđượccaomềm,sờkhồngdínhtay.Chocaomềmvàotủsấy,sấycho đếnkhiđộẩmcủacaođạtkhoảngdưới10%. 2.5.2.Phươngphápbàochếviênnangcứngtừcaodượcliệu[2,9] Caodượcliệuđạtyêucầuđượcnghiềnnhỏ,râyquacỡrây180. ­Chọncỡnang: Chúngtôixácđịnhcỡnangtheocôngthức: Khốiiượngthuốcđóngvàonang=KhốilượngriêngbiểukiếnXDungtíchnang. Khốilượngriêngbiểukiếncủakhốibộtđượctínhtheocôngthức: đ=m /v Từđóchọnđượccỡnangthíchhợp. 2.5.3.Vậnhànhmáyđóngnangbántựđộng MáyđóngnangbántựđộngmodelDTJ­CcùaTrungQuốcđượcvậnhànhvớicácthôngsốnhưsau: ­Nguồnđiện:380V­50Hz. ­Côngsuất:3,15KW. ­Độchânkhông:20m3/giờ0,02­0,03Mpa. ­Cỡnangsố0. ­Năngsuất: 11.000nang/giờ. 2.5.4.Côngthứchỗnhọpđóngvàonang Caodượcliệu:98%;bộtTalc:l,0%;Aerosil: 1,0%. 2.5.5.Phưongphápthửđộctilthcp[1,3 ,7 ,8 ] XácđịnhđộctínhcẩpLDsotrênchuộtnhắttrắngtheođườnguốngbằngphươngphápLitchfield­Wilcoxon. Thửđộctínhcấpnhằmxácđịnh:Liềuantoàn,liềuđungnạptốiđa,liềugâyrađộctínhcóthểquansát được,liềuthấpnhấtcóthểgâychếtđộngvậtthínghiệm(nếucó),liềuLD50,xácđịnhnhữngcơquanđích gâyđộctínhcủathuốc,nhữngtriệuchứngngộđộcđiểnhnhcóthểquansátđượctrênđộngvậtvàkhảnăng phụchồi(nếucó). Chuộtnhắttrắng(đựcvàcái)8tuầntuổiđượcsửdụngchoviệcnghiêncửuđộctínhcấpđãđượclaitạo vànuôidưỡngtạiViệnVệsinhdịchtễTW.Chuộtđượcnhốttrongcáclồng bằngthépkhôngrỉvàđượcrải vỏtrấusạch. Cácloài độngvậtđãđượcđưađếnđiềukiệnphòngthínghiệm1 tuầntrước khi thửnghiệm. Nhiệtđộtronglồngđượcduytrtừ25±2°cvớiđộầmtươngđối30­70%vàchukỳchiếusángthiếtlậpđể chiếusáng12gịờvàđểtối 12giờ.Chuộtđượcchoăn thứcănviênphòngthínghiệmtiêuchuan(M/sGold MohurThựcphẩmvàFeedsLtd,Bangalore,ẤnĐộ). 524
4. Chuộtnhắtđượcchiangẫunhiênthành7nhóm(n=10).Chuộtđượcchonhịnănquađêm,nhưngđược uống nước tự do vàsau đóuống địch chiết nước Bảo nhãn khang dường huyết ở 6 mức liều trên. Nhómchứngđượcchouống 10ml/kgdungdịchmuốisinhlý. Cáchxửlýmẫuvàchuẩnbịmẫuthử:Cânchínhxácmộtlượngmẫuthử,nghiềnmịn,chotừtừnướccất đểhòatan,thêmnướccấtvừađủđểthuđượcdungdịchlg/lml.Từdungdịchgốcphaloãngvớinướccấtđể đượchỗndịchcỏcácnồngđộthíchhọp,cụthểnhưsau: Đảng1.Liềudựkiếntrênchuột Sốgamcao Liềutrênngưòi Liềuquyđồitrênchuột Liềudưkiếntrênchuột Tỉlệliềudùng D L/lnang {1/12liềungười) (20g) chuột/người 0,578g 18nang/người/ngày 0,017g/kg/ngày 0,17g/kg/ngày 10lần 0,017 g/kg/ngày 0,51 g/kg/ngày 30lần 0,017g/kg/ngày 0,85g/kg/ngày 50lần 0,017g/kg/ngày 1,19g/kg/ngày 70lần 0,0Í7g/kg/ngày 1,36g/kg/ngày 80lần 0,017g/kg/ngày 1,53g/kg/ngày 90lần Thodõiđánhgiá +NeumộtthínghiệmđộccấpdiễnđượctiếnhànhthuậnlợiththuđượcLD50(đểđánhgiámứcđộđộc vàcẩnthậnkhisửđụng),thuđượcliềutốiđaantoànchocácthínghiệmkhác,thuđượcmộtsốtriệuchứng quýgiácógiátrịgợiýchoviệctmcơchếgâyđộcvàtheodõitrênlâmsàng. +Khitiếnhànhthínghiệmđộctínhcấpthuốccổtruyền,cóthểgặpphảimộtsốphứctạpnhưkhácbiệt vóilýthuyếtyhọccổtruyềnhoặcyhọchiệnđại,khôngxửlýđượcdạngthuốcđểthửbằngchínhđường uốngvàtnhhnhsúcvậtchếtkhôngtheoquyluậtlượngđổi,chấtđổi. Tiếnhànhtheodôichuộttrongvòng14ngàysaukhiuốngchếphẩmthử,ghichéplạicácthôngsốsau: ­Tnhtrạngchungcủachuột:hoạtđộngtựnhiên,tưthế,màusắc(mũi,tai,đuôi),lông,phấn,nướctiểu... “Sựtiêuthụthứcăn,nướcuổng. ­Sốđộngvậtchết.Khichuộtchếtmổđểquansátđạithểcáccơquanphủtạng.Nếucầncóthểlàmthêm vithểđểxácđịnhnguyênnhân. ­XácđịnhLD50:Đếmsốchuộtchếtờcáclôtrongvòng72giờđểtínhtoánLDS0. Quansátcácdấuhiệucủanhiễmđộcđượcthựchiệnờ15,30,60,120,180phút,24giờvàtừngngàyđến ngàythứ14saukhichochuộtuốngdịchchiết. 2.6. PhươngphápxửlýỈhốiỉgkêvàtínhkếtquả[7] 2.6.1. Trườnghọpxácđịnhđượccụthể sốđộngvậtchết Kếtquảđượcxửlýbằngtestt­student(đểtmsựkhácbiệtgiữa2nhóm)vàtestANOVAmộtchiềuđểtmsự khácbiệtcóýnghĩagiữacácnhóm.CáckétquảthốngkêđượcthụchiệnbằngphầnmềmS­plus8.0.Kiểmtraphương saicủacácnhómbằngđồthịhnhhộp(box­plot).Giátrịp<0,05đượcxemlàkhácbiệtcóýnghĩathốngkê. TínhLD50theoBehrens _ (5 0 ­a)Xd LD50= A+ ­­­­­­­­­­­­­­­­­ b ­ a Trongđó: A ­Liềugâychếta%ĐVTN; a­%ĐVTNchếtsátdưới50%saochoa<50%; b­%ĐVTNchếtsáttrên50%saochob>50%; d­khoảngcáchgiữacácỉiều(g). 525
5. Tínhsaisốchuẩn: kSd (sLDsO)2= ---------- Trongđó: k:hệsốBehrens=0,66 n:Sốchuộttrongmỗinhóm. Tinhsaisỗchuẩn: kSđ (SjLD5o)2“ ­­­­­­ 7­­­­­­ n Trongđó: k:hệsốBehrens=0,66 n:Sốchuộttrongmỗinhóm. kSd Saisốchuẩn: (sLsO)2= -------------- n Độđộcchuột­ ...M ư/m ldịchchiết. 2.6.2.Trườnghợpxácđịnhđộctínhcp,nhưngkhôngtìmđượcLDso Cóthểgặp2trườnghợp: ­Đãthửđếnliềucóđộngvậtthínghiệmchết,nhưngkhôngcóliềunàođạtmứcđộchết100%hoặcgần 100%.KhiđótuykhôngxácđịnhđượcLDsonhưngtavẫnxácđịnhđượcliềutốiđamàkhôngcóconvật nàochết,gọilàliềudướiliềuchết(LD0). Trongnghiêncứu,đểxácđịnhLĐ50,thôngthườngLD50gấp2­3lầnLD0.Vvậy,liềutươngđốiantoàn Dsdùngchothựcnghiệmdượclýbanđầuđượclấygiátrị 1/5LD0(nếuxácđịnhđượcLD50thliềuDs= 1/10LDjO). ­Trườnghọptấtcảcácliềuđãthửđềukhôngcóconvậtnàochết,thliềulớnnhấtđãthửDmaxchưachắc làliềuLĐ0vàliềụtươngđốiantoànDsdùngchothựcnghiệmdượclýbanđầucóthểdùngbằng 1/5Dmax. ra.KẾTQUẢ 3.1.BàochếviênnangBảonhãnkhangdưnghuyết 3.1.1.Bàochếcaodượcliệu Quakhảosáttrên5ỉônhỏ,mồilô600gdượcliệu,chúngtôithuđượcsốliệunhưsau: Khốilượngcaodượcliệuthuđượcthểhiệnờbảngsau: Bảng2.Kếtquảbàochếcaodượcliệu Khổỉlượngriêng Khếilượngriêng Khốilượngriêng Khốilượngriêng Tổngsốđượcliệuđưavàobàochế Gam 624 Dịchchiết1 MiỉiUt 1000 Địchchiết2 Mililit 870 Dịchchiết3 Miỉilit 500 Lượngcaokhôthuđược Gam 62 Nhưvậy,lượngcaokhôthuđượctừdượcliệuthèotỷlệ ­ 1/10(caokhô/dượcliệu). 526
6. 3.1.2.Kiểmtrađộẩmcủacaodượcliệu Tiếnhànhkiểmtramộtsốchỉtiêuđộẩmtheophươngphápsấykhôtrongtùsấyởđiềukiệnnhiệtđộnhất địnhđểxácđịnhmấtkhốilượngdolàmkhô(PL9.6DĐVNIV):bộtcaođượcđựngtrongchénsứchịu nhiệt,đemsấyở80°cđếnkhốilượngkhôngđổi. Kếtquảkiểmtratrên5lôsảnphẩmnhưsau: Bảng3.Kếtquảkiểmtrađộẩmcủacaodượcliệu Têncáclô Độẩm Ghichú Lôsố 1 5,6% Lôsố2 6,0% Lôsố3 6,7% Lôsố4 5,7% Lôsố5 1,3% Caodượcliệuvớiđộẩmnhưtrêndạtyêucầuđểđóngvàonangcứngvớitiêuchíviênnangchứacàngít íádượccàngtốt. 3.1.3.KếtquảbàochếviênnangcứngBảonhãnkhangdưnghuyết *Chọncỡnang: Khốilượngthuốcđóngvàonang=KLRbiểukiếnXdungtíchnang. Khốilượngriêngbiểukiếncủabộtcaođượctínhtheocôngthức: d=m /v Cânlgbộtcaochovàoốngđongchínhxácloại 10ml,gõnhẹchođếnthểtíchkhôngđổi,kếtquảthể tíchlà1,30ml. VậyKLRbiểukiếncủabộtdlà1/1,3=0,76g/mi. Dựkiếnđngminang500mg. 500mgbộtcaonàychiếmdungtíchỉà:0,5/0,76­ 0,66mi. Dungtíchnàygầnvớinangsố0(cóđungtích0,67ml).Vậychọncỡnangsố0làthíchhọp. *Đngnang: Kếtquảđóngnangnhưsau: ­Tổngkhốilượngbột:m=316,2g. ­Khốilượngtrangbnh 1nanglà590mg. ­Tổngsốnangđóngđượclà525nang. Vớikếtquảtrêncóthểtínhliềudùngmộtngàyhợplýchosảnphẩm.Toànbộquytrnhbàochếviên nangcứngBảonhãnkhangdưỡnghuyếtđượcmôtảquasơđồtóm tắtsauđây: 527
7. Hnh1.SơđồquytrnhbàochếviênnangcứngBảonhãnkhangdưỡnghuyết 3.1.4.Kếtquảthửđộctínhcấp ­Chuộtđượcnhịnãn 15giờtrướckhithínghiệm,nướcuốngtheonhucầu.Kiểmtracânnặngtrướckhi thửnghiệm.Chuộtđạtcácyêucầuvềcânnặngđượcđưavàothửnghiệm. ­Tiếnhànhthửnghiệmchínhthứctrên80chuột,chathành7nhómthửtheomứcliềuđãdựtính. ­Lịchtheodõi:Theodõibiểuhiệncủachuộtsaukhiuốngtrong24giờđầuvàtheodõihoạtđộngcủa ĐVTNtrongthờigian14ngàysaukhiuống. * Kếtquảthodõi: a.Tiêuthụthứcănvàuốngcửachuột Saukhiuốngdungdichthử:chuộtvẫnhoạtđộng,ănuốngbnhthường, b.Quansátđẩuhiệungộđộc: Khôngnhậnthấybiểuhiệnngộđộctrênchuộtthínghiệmtrong7ngàytheodõi. Mổchuộttrongcáclôthấytim,thậntươinhuận;dạdày,ruộthếtthuốc. c.Kếtquảtỷlệchuộtchếttrongcáclô 528
8. Bảng4.Kếtquảthửđộctínhcấptrênchuột Liềuthử Sổchuột sếchuộtchết/sếng Mứcliều %chết (mlđịchchiếtgốc/kgchuột) chết/sếngthựctế kỳvọng Mứcliều1 0,17ml/kg 0 0 0 Mứcliều2 0,51ml/kg 0 0 0 Mứcliều3 0,85ml/kg 0 0 0 Mứcliều4 1,19ml/kg 0 0 0 Mứcliều5 1,36ml/kg 0 0 0 Mứcliều6 1,53ml/kg 0 0 0 IV.BÀNLUẬN KếtquảsaukhiuốngthuốcBảonhãnkhangdưỡnghuyếtvới6mứcliều,chuộthoạtđộngbnhthường, sau72giờđầuvà7ngàytheodõikhôngcóchuộtnàochết. Đểđảmbảochokếtquảtincậy,chúngtôiquyếtđịnhthửtiếptrên1lôchuộtnữa(10con)vớimứcliều lớnnhấtcóthể(nồngđộvàthểtíchtốiđachophépcóthểhòatanđượcvàchochuộtuốngđược).Quaquá trnhkhảosátnhậnthấyrằngmứcliềucaonhấtcóthểlà1,7g/kgchuột,sau7ngàyquansátvẫnchưathấy chuộtnàochết. Nhưvậy,chuộtuốngđếnliềucaonhấtcóthể(nồngđộvàthểtíchtốiđachophép)là1,7g/kgtrọng lượngnhưngchưathấybiểuhiệnngộđộcvàkhôngcóchuộtchểttrongvòng72giờ,vvậychưaxácđịnh đượcLDgotrênchuộtnhắttrắngtheođườnguống,liềulớnnhấtchúngtôiđãthử(Dmax=1,7g/kg)chưachắc làLD0.Theotàiliệu[14]thliềutươngđốiantoànDsdùngchothựcnghiệmdượclýbanđầulúcnàyđược tínhlàDs=l/5Dmax=0,34gam/kgtrọnglượng. CóthểnhậnthấyrằngcaothuốcBảonhãnkhangdưỡnghuyếtlàbàithuốccónhữngdượcliệuđượcnhân dântasửdụngtừlâuvàantoànvớingườisửdụng.Điềunàychothấymẫuthửthuốctrênantoàn. Kếtluận:viênnangBảonhãnkhangdưỡnghuyếtantoàn.LiềutưcmgđốiantoànlàDs=0,34gam/kgchuột. V. K ẾTLUẬN ­ĐãbàochếđượcviênnangcứngBảonhãnkhangdưỡnghuyếtởquymôpilot: Tổngsốnangđóngđượclà525nang. ­Đãthửđượcđộctínhcấp:viênnangbảonhãnkhangdưỡnghuyếtantoàn.Liềutươngđốiantoànlà Ds~0,34g/kgchuột. TÀILIỆUTHAMKHẢO 1.ĐỗTrungĐàm(1996),Phươngphápxácđịnhđộctínhcẩpcủathuốc,NhàxuấtbảnYhọc,HàNội. 2.TrườngĐạiHọcDượcHàNội(2006),KỹthuậtBàochếvàsinhdượchọctập1,2, NhàxuấtbảnYhọc,HàNội. 3.TrườngĐạiHọcDượcHàNội(2002),Dượchọccổtruyền,NhàxuấtbảnYhọc,HàNội. 4.NguyễnVănĐàn,NgôNgọcKhuyển,Hợpchấtthiênnhiênđùnglàmthuốc,NhàxuấtbảnYhọc,HàNội. 5.ĐỗTấtLợi(2000),NhữngcâythuốcvàvịthuốcViệtNam,NhàxuấtbảnYhọc,HàNội. 6.ViệnDượcliệu(2006),Nghiêncứuthuốctừthảodược,NhàxuấtbànKhoahọckỹthuật,HàNội. 7.Phươngphápnghiêncứutácđụngđượclýcủathuốctừđượcthảo2006. ^ 8.OECDguidelinesfortestingofchemicals.Acuteoraltoxicity­FixeddoseprocedureOECD420,2001. 9. Handbook of pharmaceutical excipients ­ Published by the pharmaceutical Press and American pharmasists Association­2009. 529