Khảo sát giá trị của kỹ thuật Elisa tìm kháng thể kháng T.Vaginalis và tỷ lệ nhiễm T.Vaginalis ở Thành phố Huế
8 trang
03/04/2025
50
Bạn đang xem tài liệu "Khảo sát giá trị của kỹ thuật Elisa tìm kháng thể kháng T.Vaginalis và tỷ lệ nhiễm T.Vaginalis ở Thành phố Huế", để tải tài liệu gốc về máy bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
Tài liệu đính kèm:
- khao_sat_gia_tri_cua_ky_thuat_elisa_tim_khang_the_khang_t_va.pdf
Nội dung text: Khảo sát giá trị của kỹ thuật Elisa tìm kháng thể kháng T.Vaginalis và tỷ lệ nhiễm T.Vaginalis ở Thành phố Huế
- KHẢO SÁT GIÁ TRỊ CỦA KỸ THUẬT ELISA TÌM KHÁNG THẺ KHÁNG T. VAGINALIS VÀ TỶ LỆ NHIỄM T. VAGINALIS Ở THÀNH PHỔ HUẾ BS. Phan Thị Hằng Giang* Hướng dẫn: TS. Tôn Nữ Phương Anh TÓM TẮT Viêm âm đạo đo Trichomonas vaginalis là là bệnh lây íruyền qua đường t nh đục phổ biến nhất trên khắp thế giới. Nghiên cứu này nhằm đánh giá kỹ thuật ELĨSA và xác định tỷ ỉệ nhiễm T. vaginalis và tỷ lệ mang kháng thể kháng T. vaginalis ở TP Huể. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Khảo sát huyết thanh của 249 bệnh nhân (BN) viêm âm đạo, 534 phụ nữ không triệu chứng, 38 nam giới khỏe mạnh và 50 mẫu huyết thanh trẻ em 2 10 tuổi ở TP Huế từ 9/2010 6/2012. Ngoài ra, kháng thể kháng T. vaginalis đặc hiệu của 46 BN nhiễm T. vaginalis và 8 người t nh của BN nhiễm r. vaginalis. Tất cả nữ BN đều được khám lâm sàng, lấy mẫu địch âm đạo để soi trực tiếp T. vagnaỉis. Huyết thanh của BN nhiễm T. vaginalis đồng thòi để làm chứng dương cho test ELISA phát hiện kháng thể kháng T. vaginalis để đánh giá huyết thanh miễn dịch. Kết quả: Kỹ thuật ELISA phát hiện kháng thể kháng T. vaginalis có độ nhạy 93,48%, độ đặc hiệu 84,88%. Tỷ lệ nhiễm T. vaginalis ở nhóm phụ nữ có triệu chứng là 19,3% (42/243, 95% CI = 12.8% 22.7%), ở nhóm phụ nữ không triệu chửng là 0,7% (4/534, 95% CI “ 0.18% 1.8%) dựa vào kết quả soi kính hiển vi. Huyết thanh miễn dịch cho thấy tỷ lệ mang kháng thể kháng T. vaginalis ở phụ nữ là 18,9%, ở nam giới là 8.7%, ở phụ nữ có triệu chứng là 31.3%, phụ nữ không triệu chứng là 13,3% Tỷ lệ mang kháng thể kháng T. vaginalis ở phụ nữ t nh đục an toàn là 14%, ở phụ nữ t nh đục không an toàn là 22,7%, ờ nam giới khỏe mạnh là 7,9%, ở nam giới là bạn t nh của phụ nữ nhiễm T. vaginalis là 12,5%. Kết luận: Tỷ lệ nhiễm T. vaginalis cao ở phụ nữ có Iriệu chứng và thấp ờ phụ nữ không có triệu chứng. Kỹ thuật Elisa cho thấy có độ nhạy và độ đặc hiệu cao hữu ích cho chẩn đoán nhiễm Trichomonas vaginalis, nhất là trong nghiên cứu địch tễ học. * Từ khóa: T. vaginalis-, Huyết thanh dịch tễ học; ELISA. Evaluating the relừibUtíy ofELISA assay to find the antibody against T. vaginalis infection in Hue province Sum m ary The protist Trichomonas vaginalis is the most common nonviral, curable, sexually transmitted disease agent worldwide. The objective of this study is to determinethe prevalence of trichomoniasispatients in Hue City, Vietnam and its serological patterns. Materials and methods: The study included 249 symptomatic women, 534 asymptomatic women, 38 healthy men, and 50 sera of children 210 years of age from Hue City, Vietnam from September 2010 ÍO June 2012. In addition, specific antiT. vaginalis antibody response was studied in a group of 46 women affected by trichomoniasis and 8 male sexual partners. All women were subjected to standard clinical examination and vaginal samples were collected for identification of Trichomonas vaginalis by wet mount and cultivation in specific media. Sera from trichomoniasis patients were used to set up immunoenzymatic techniques to detect specific antibody response for seroepidemiological studies. Results: The sensitivity and specificity of ELISA assay were 93,48%, 84,88% respectively.The prevalence of trichomoniasis diagnosed by microscopic examination in symptomatic womenand asymptomatic groups were 19.3% (42/243, 95% Cl ~ 12.8% 22.7%) and 0.7% (4/534, 95% Cl 0.18% 1.8%), respectively. The seroprevalence from general population were found 18.9% in women and 8.7% in men. The seroprevalence were 31.3% in symptomatic women, 13.3% in asymptomaticwomen. The seroprevalence was 14% in safe sex behavior women to compare with 22.7% in unsafe sex behavior women. There were 7.9% seropositive from sera of healthy men and 12.5% seropositive from sera of men partners of trichomoniasis women. Conclusion: In general, the prevalence of T. vaginalis infection is high in symptomatic women and low in asymptomatic women. ELISA essay yielded high sensitivity and specificity in diagnosis of vaginal trichomoniasis. * Key words: T. vaginalis-, Seroepidemiology; ELISA. * Đại học Y Dược Huế 428
- ĩ. ĐẶT V N Đ Bệnh viêm âm đạo (VÂĐ) do Trichomonas vaginalis là bệnh lây truyền qua đường t nh dục (STD) phổ biển nhất gây ra do bởi đom bào ký sinh T. vaginalis. Theo tổ chức Y tể thế giói (WHO), hàng năm có khảng 280 triệu phụ nữ nhiễm T. vaginalis [12,23]. VÂĐ do T. vaginalis có thể gây sẩy thai và gây tăng nguy cơ nhiễm HIV [22]. Hiện nay, các kỹ thuật chẩn đoán gồm soi tươi trực tiếp dịch âm đạo, nhuộm và nuôi cấy. Độ tin cậy của kỹ thuật còn phụ thuộc vào cách ỉấy bệnh phẩm, qui tr nh kỹ thuật và kỹ thuật ứng dụng. Hiện nay ở Việt Nam chỉ sử dụng kỹ thuật xét nghiệm trực tiếp (XNTT) dịch âm đặo t m T. vaginalis. Chúng tôi thực hiện đề tài: Khảo sát giá trị của kỹ thuật ELĨSA tìm kháng thể kháng T. vaginalis và tỷ lệ nhiễm Trichomonas vaginalis ở TP Huế nhằm: - Đánh giá giá trị cửa kỹ thuật ELỈSA phát hiện kháng thể kháng T. vaginalis. - So sánh tỷ lệ nhiễm T.vaginatís và tỷ lệ mang kháng thể kháng T. vaginalis. II. ĐỐI TƯỢNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1. Địa điểm nghiên cứa Đây íà nghiên cứu mô tả cắt ngang được tiến hành từ tháng 9/2010 6/2012 bởi: Phòng khám Phụ khoa, Bệnh vịện trường Đại học Y Dược Huế. Trung Êấm Chăm sóc Sức khỏe Sinh sàn TP. Hué. Khoa Ký sinh trùng, Bệnh viện Trường Đại học Y Dược Hué. Phân khoa Vi s nh học Lâm sàng và Thực nghiệm Bộ môn Sinh y học Đại học Sassari, Ý. 2.2. Đổi tượng nghiên cứu Phụ nữ c triệu chứng: Tất cả những phụ nữ đến khám phụ khoa tại Bệnh viện Đại học Y Dược Hué, Trung tâm Chăm sóc Sốc khỏe Sinh sản TP. Huế v triệu chứng viêm nhiễm âm đạo. Tổng số BN thuộc nhóm này là 249 người. Phụ nữ không c triệu chứng: Có 534 phụ nữ không có triệu chứng VÂĐ từ các 11 phường xã tinh Thừa Thiên Huế (huyện Phú Vang, TP Huế, huyện Nam Đông). Bệnh nhân nhiễm Trichomonas vaginalis: Từ hai nhóm phụ nữ có triệu chứng và không có triệu chứng, phát hiện được 52 BN nhiêm. T. vaginalis. Trong đó có 46 BN tham gia nghiên cứu để đánh giá giá trị của kỹ thuật ELĨSA. Chúng tôi chọn những mẫu dương tính mạnh để ỉàm chứng dương của phản ứng ELĨSA, Nam giới: 8 nam giới ỉà chông (hay bạn t nh của phụ nữ nhiễm T. vaginalis) là nhóm nam giới có nguy cơ và 38 nam giói không có nguy cơ được định nghĩa là ít có khả năng nhiễm bệnh lây truyền qụạ đườitg t nh dục, gồm có s nh viên, bệnh nhân đén xét nghiệm nấm da. Trẻ m: Cht ng tôichọn huyết thanh của trẻ em tuồi từ 210 tuổi, ít có nguy cơ nhiễm STD, ít có khá năng có kháng thể kháng T. vaginalis từ mẹ truyền sang. Những mẫu âm tính rõ được dùng làm chứng âm eủa phản ứng ELISA. 2.3. Phương pháp nghiên cứu Tất cả các mẫu huyết thanh của đối tượng nghiên cứu đều được làm phản ứng ELISA. Khảo sát các đặc điểm cá nhân gia đ nh và xã hội, khám âm sàng và xét nghiệm dịch âm đạo của tất cả phụ nữ có triệu chứng và không có triệu chứng. 2.3.1. Khảo sát các yếu tể cá nhân gia đình và xã hội Các yếu tố cá nhân gia đ nh xã hội gồm: tuổi giới nghề nghiệp, tr nh độ văn hóa... 2.3.2. Tmh trạng sinh hoạt tình dục - Tình dục an toàn: Bản thân người đó và chồng/bạn tình có duy nh t 1 bạn tình, hoặc thường xuyên sử dụng bao cao su. Nhóm này gồm những phụ nữ có gia đ nh ổn định. 429
- ::raăsk irtsVi. *\.i ‘h 2.3.5. Ky thuạt ELISẠ;: ■.’ 1% ^s sẾâìiìíií '^SÍÍ&ỈV iiíỊỉS tfV&iij JvrfrLlS '"ứứìiẽà. -Ịt( 'Hẻ*"* ì^ú K'.s'i's, M% ínlỉẩl ■'■ Kỹ thuật ELĨSA được |iỊn,hành theqphựờng ẸỆiáỊađirơG^ữổiíặ^ọi; Ậ$đfsỀ%p?é$ (í^84) |eỉ:yà:Masòh p R (2001) [4] dùng chủng G3 T. vaginalis ĩầm kháng nguyên. Dĩa phản ứng ELISA được lam tại phân khoa Vi sinh học Lâm sàng và Thực nghiệm, Bộ môn ^lf4ẩko"UH«3 Ĩ.Ò& M 1 ml máu bệnh nhân đựng trong ống không cổ chat chống đông, tách lay huyểt thanh cat giữ ở nhiệt độ 20°c để ỉàmphản ứng ELISA phát hiện kháng thể IgG kháng T. vaginalis. £§ắi%ss áỉjỊ6'.,L& Mỗi dĩa ELISA đềukồề im ò à g ổ ìĩờ ẩ g ; I chM g ếẩỂsfàầ?3$Ế&ặtiắt ^ẽ cl táPđúỉ l*ề$tf9ệểỉịtôòsphat buffer saline (PBS). oựya Y ìụữ -gữớưứ rsậiv ẩiíặ '&ŨỔ-Ẳ ụ?n - Đo mật độ quang (Optical Density: OD) của phản ú^ iằi grnạáỵ đ©èíBMSA:íBỉbrẩd'680:KừỚẾắ'ẩóỊEíg« nm trong vong 15 30 phút. %/H Y OOỈÍ 'S’fĩ 'ịíĩớưìT ,fỉệh" .rkíậll t.pifỊ:ứ'sj ííidíi 7ĨỈ SOÀ/^Ĩ 2.4. Y đưc Ỹ' .risgỵ&c :Yy.fị lííG ixfd V ĨÍĨÚ2- Pibúĩ 0 0 ỉ^vậiíibĩíí 'i'iifi’.i ổ'v' ậ':ắs :Ts&I 3 ỌÍÍ flĩĩhí iV scibí i’l'JkH " Nghiên cứu được xét duyệt bởi Hội đồng Y đức Trường Đại học Y D ư ự £ # ụ < i^^ q yí^$kí& pm ột Sô liệu được nhập vào chương tr nh Microsoft Excel 2010 và xử lý theo M stó :, aậíĩí 6 3 ¥ tòdá íta .ạdíí m 0 0 5#ft ^ III. K Ế T QUẢ ũĩỉúắ ĩ^K iá ẬỉiH ? $psS'ĩ hiH íiậ^iííỉ) ĩíàsiíT m đ ĩ wnậí§>s|ẸịặỊỈ điểmfcủa inẫụ ỉigh iên èứu Ẵm íịíìq mòilít ÍÊLíỉ iĩT p&ễn. vitóVE >:Ếk>BângCvỊ.^ậẾí^lnlt^ủă^ẫt ypiêẺbiHíiíí^ ’}k *'a ^ .‘ỹiaróạ^ £ Ịiiéĩns ViH £?. rtậíĩỉ ẳ&íỉí| *A2 ÍJ'’I jgi'iii z t ;:, £ĩj&'?fo ĩĩdẴ mẩsựựst từmẸựửjĩỉi sm:ir ’OfrtH'isi C'nán; Í<>í afỉíjĩỉj ,A«lĩJiS Ĩ&KRĨ Vf , ; Phpiiirc^n^ch^^#^ , ria M ềằẫmếẵĩiĩỀi ífe .^ ẺáPấ$$ ál K'dgn ‘lí' ị& ĩ ị ự ĩ D ữ > 49)i; Sc ểv ĨX C hẫở • utó Ití&iTỈ ítọỉí Oíỉb íĩỉỉíỉiri ỉ nSí iịHií/ yd/ilk ,Uiì ,iiT3 ữĩl ĩ t x:ữ vtỉgr? 3Ì 'ổ f sửo íteỉư ĩ ỉốyĩír gaỉfiO :®ls ãít iừ>$0 :&í|lKôh> máỉ Ị2 Kổfc ãii rfĩồ? íỉĩ yíiií Ịms ầiiĩ b Trình độ văn h a Cao 39,1% tiẳầíặp gmsaítH Ầl£, .Thấp ,Á3L [3 't® 1 iỉẳẻK ưấỉ> S.ĨỈĨ3 ỄisâMiiya tiĩựíĩi ìềh RÙn á m (ề^ Ì ệ Ẹ ú íỗía k i ÍỐT |sứ;P ỉ-ềx sv %fĩỀS ĩĩĩ&ĩ .ỈÌĨHÍÌM ,iỌíỉ. nia  " Ỉỉẫĩrỏ Ũ0 fM tt .9. r;^.r '.^r i^.gĩ— í'ừỉ'ỉ5 sỉSni òĩ} %múẲ ẴK‘' ỉĩậí‘ứ Ò'J ifỉỉ Wia tình dục 46,9% ;ẵ ‘ằ smẩííỉ ềề ’ § ^ 1 thề ủ-ếíấầ ;ĨẦÌẴ An toàn 5 3 4 % ỄệĩlSĩíéựổẩí ầs Ấĩi'9 Không an toàn j;;ồẩ ấỉằ? ệb ĩkửĩĩ Tqậirf^fĩ ềổgíỉ iàíg iôí ĩ :mểt ?ộd ãx firaifc ỗ^®lĩữ’ ầo h ỉầ ỵ osD ...... ĩ.§Q£ i AX —1 ữcó o®:ỉ ■ítâ® zpizfb
- 3.j£ Bánh gỉẩ sỉátrị ciiiẩii đoán, độ nhạy, đỗ đạ£ịhi|u cua kỷ thuật ẸLĨSẢ ft’ ỉ < ị 3.2.1. Sơ'sánh'10-Ệệ qíiang trưngbìnhcủa phan ứng huyết thaiìh của các i ỉ l ^ :^fuêncứu I Nhóm.....— ........ OĐ (mean ±lSĐ) ..... .......“ rT ;;*:................ Trè.em........1— 1..— .... ..... 0,080 + 0,0 1(1)....;.... ...........PlvS2<O,O01......... PJ.td8 Uì\ iXí 0 < _ 1 í ™ S.(Q,Q70J2I.....ị....... Naft^gỉồiMỒéittMỉítỉ ỘỈI vi'v’iMx.cy ảỉ Yụúíì & Mĩ ::0H 2' ÍD;Ồ34£p^> & lậíE ầ$jệỷãợ$8 ỵặ'ĩ ỉ* ”4 J^ởCẬỈ i.y > Jú) ± dS..O p m ỉ -&>■■ ịũm p \ . ^ H' M- ,T" **..< ;* ;'^(0;072^0;20); • % ^w, .Ví. n . ựi&yp Oíb í à l i i ặ a i s i S r ỉ iiiii ịtàtiữ ẾẾ§m m^ w ; ■úể<ĩiÌv&~ịỳ$Qộ$::;jh íí, ìiĩ ’'-lê iĩứi 0 ^ ? ủỉ"b uĩm i:: 'Tp3vs5< OrOOQt ^Ẽs 5: Phụ nữ có triệu chứng 0,144 ± 0,04(4) ;; . :K; : ..p4^5^ 0 0 Ợ t \ 201 lóíPiíp4'BtK4Q|?)S i '/.fes Ễ^vs^< 0,0001 T ị<- Phụ nữ nhiễm ĩ.ỉịiĩ\ ^ỉ«ầfí. 0^238 í 0ị07fs) ^ ip^^õoi • ỉ &ũ i ^ m n - Ọ & S ........ .: i ^p;ivs5;< 0,0001 với ịcác nhóm khác v<ji p<0,05vx |.2 .2 . K hảosát đọ nhạy và độ đặc tóịệu của kỹ Auật ELISA b ng đưòtig cong ROC ^ ị add' gi ôK I ’ /\ 'X' • ........ ......... í ĩ ị xẦịệ, íim^? ^1 •ấỉíMs Ị ~ 1 11 Jr- B í.:l\u ị q ầ rrr I ò£* ị / " i l l I tm s : \ Iị —............... 4 ĩ. í 7 ..... "f .......... ..... ......— 1 ỵệk. ỉ í b í í í t ủ x ừ ỉ,3 ^ ị'ữ I • / / ĩ ị"ýjổ\ộ. r ũâoỉ F.Ả ị Ỉ00G,0> ỹ ; 0BP£l 1 W3^' 1. ........1..............."•••• • .......... .. Biểu đồ 1. Đường cong ROC đánh giá đọ nhạy và ứọ đặL hiẹu cuắ kỹ thuạt ẺLISA sư dụng xết n^iiiẹnr ‘r íilnlăm trêií ^hnẩn rKẳn rtnán ^si)/ĩỡí»nỉfc^'rh «Á jÀĨ:ir /:Awb'nnHAr tlik:ữnr:'mi^^ QÌrf.Yữ4:'O : — 0,8900,931), p 1 Ỉỉệuầề i t o ị g # X % ũm 3.2.3. Khảo sắt đọ nhạỵịvp ậ ệ đạc hiệu cĩua kỹ thuật vơt ặ c điếm cat OD kjui&;nhau 13 .w 3 £)ộ rthayM đô đăe htêư eửể kv' thuârELISA või cáG điểm cắĩkH“ác'nKáiĩ' " ~T7“ “ 'ĩíWầề'jì vầki\ 1 IDŨO.ÍĐiễmỊcắtODỈựe ị QBậ\ỔKạy(%) 1 1..............>.0,168.....M; ..... ...... ị. — ................... ị.......... ..................................................... j i 1 íAA^r >0,P i ị 84’3?ẩs Ể M ấ ĩ ị >0,172 ^ 1 ĩ i v m m Ị 84,60 •;? gíídPỈ
- >0,173 93,48 84,74 >0,174* 93,48 84,88 >0;175 89,13 85,44 > 0,176 86,96 85,71 > 0,177 86,96 86,13 Như vậy với điềm cắt mật độ quang (OD) lằ 0,174 th độ nhạy là 93,48%, độ đặc hiệu là 84.88%. Mật độ quang trang b nh của BN nhiễm T. vaginalis dùng làm chứng dương 0,306 ± 0,120 (0,175 " 0,582), Mật độ quang trung b nh của chứng âm (huyết thanh trẻ em) 0,123 ± 0,03 (0,087 0,173). Như vậy, không có chứng âm nào dương tính với phản ứng cũng như không có chứng dương nào âm tính với phản ứng. Điều này cho thấy độ tin cậy của test ELĨSA, hữu ích cho điều ừa địch tễ học bệnh T. vaginalis 3.3. T ỷ lệ nhiễm Trichomonas vaginalis 3.3.1. Tỷ lệ nhiễm T. vaginatís bằng kỹ th u ật xét nghiệm trự c tiếp Bảng 4. Tỷ lệ nhiễm T. vaginaỉisở các phân nhóm nghiên cứu Phân nhóm Số trường họp Tỷ lệ (%) p Triệu chứng Phụ nữ có triệu chứng 48/249 19,3 <0,0001 Phụ nữ không có triệu chứng 4/534 0,7 Ch ở Thành thị 30/283 10,6 0,0014 Nông thôn 22/500 4,4 Trình độ vãn h a Thấp 31/228 13,6 <0,0001 Cao 21/555 3,8 Tĩnh trạng sinh hoạt tình dạc An toàn 19/603 3,2 <0,0001 Không an toàn 33/180 18,3 XNTT: tỷ lệ nhiễm T.vaginalỉs ở nhóm phụ nữ có triệu chứng 19,3% (42/243, 95% CI =514,6% 24,8%), phụ nữ không có triệu chứng 0,7% (4/534,95% Cĩ = 0,18% 1,8%). 3.3.2. Khảo sát tỷ ỉệ mang kháng thể kháng T. Vaginalis ở các nhổm nghiên cứu đánh giá bằng kỹ thuật ELISA Bảng 5. Tỷ lệ huyết thanh dương tính với kháng nguyên T. vaginalisở các nhóm nghiên cứu Nhóm n Tỷ lệ % p Triệu chửng Có triệu chứng 76/243 31,3 <0,0001 Không cổ triệu chứng 71/534 13,3 C h ở Thành thi 73/499 14,6 0,0001 Nông thôn 74/278 26,6 432
- Trình độ văn h a Thấp 97/552 17,6 0,1665 Cao 50/225 22,2 Trình trọng sinh hoạt tình dục An toàn 84/599 14,0 0,0019 Không an toàn 63/278 22,7 Giới tính Nam 4/46 8,7 0.123 Nữ 147/777 18,9 Trẻ m 0/50 0 Tỷ lệ huyết thanh dương tính với kháng nguyên T. vaginalis cao hơn ở nhóm phụ nữ có triệu chứng so với nhóm phụ nữ không triệu chứng (p<0,0001), thành thị cao hơn nông thôn (p = 0,0001), t nh dục không an toàn cao hơn an toàn(p = 0,0019). Không có mẫu huyết thanh trẻ em nào dương tính với phản ứng ELISA. 4.1. Khảo sát gỉá trị chẩn đoán của kỹ thuật ELISA Hiện nay có nhiều kỹ thuật chẩn đoán nhiễm T. vaginalis, xét nghiệm trực tiếp là kỹ thuật đom giản, kinh tế và được áp dụng rộng rãi với dộ nhạy 60% 75 [8, 12]. Fernando, Sri Lanka (2011) độ nhạy độ đặc hiệu của XNTT lên đén 95,83% và 100% khi so sánh với kỹ thuật nuôi cấy [10]. Hơn nữa, theo Mc Cann (1974) có 22,3% nhiễm T. vaginalis bị bỏ sót nếu không nuôi cấy và 13,7% bị bỏ sót nếu chỉ xét nghiệm trực tiếp [16]. Nghiên cứu của Manson p R (1979) đã chứng tỏ rằng đáp ứng miễn dịch trong bệnh nhiễm T. vaginalis là miễn dịch dịch thể IgG [5]. Nghiên cứu của AldereÈe Hoa Kỳ (1991) [6], Addis M.F. (1999) [5] khẳng định vai trò của IgG trong nhiễm T. vaginalis âm đạo. Nghiên cứu của chúng tôi lần đầu tiên thực hiện ở Việt Nam đánh giá kỹ thuật ELISA phát hiện kháng thể IgG kháng T. vaginalis. Bảng 2 cho thấy mật độ quang (OD) cùa BN nhiễm T. vaginalis cao hơn, có ý nghĩa thống kê so với nhóm trẻ em, nam giới, nhóm phụ nữ khác. Như vậy, kỹ thuật ELISA phát hiện kháng thể IgG có giá trị chẩn đoán nhiễm T. vaginalis. Phân tích độ nhạy độ đặc hiệu tại các điểm cắt (cut off) khác nhau, chúng tôi thấy độ nhạy của kỹ thuật là 93,48%, độ đặc hiệu ỉà 84,88% (tại điểm cắt OD = 0,174). Két quả tương tự nghiên cứu của Manson p R ở Zimbabwe (2001) với độ nhạy 94% 95% và độ đặc hiệu 77% 85% [0]. 4.2. Tỷ ỉệ nhiễm T. vaginalis dựa trẽn kết quả XNTT và huyết thanh miễn dịch chẩn đoán Tỷ lệ nhiễm T. vaginalis dựa trên XNTT Tỷ lệ nhiễm T. vaginalis ở phụ nữ có triệu chứng là 19,3% (48/249, 95% CI = 14.6% 24,8%) cao hơn phụ nữ không có triệu chứng là 0,7% (4/534,95% CI = 0,18% 1,8%) (bảng 4). Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p<0»0001. Tỷ iệ nhiễm ở phụ nữ sống thành thị cao hơn so với nông thôn, tr nh độ văn hóa thấp cao hơn tr nh độ văn hóa cao, t nh đục không an toàn cao hơn t nh dục an toàn. Cùng một phương pháp XNTT, tỷ lệ nhiễm T. vaginalis íhay đổi ở Việt nam: Lê văn Tề (2004) ờ miền Bắc là 5,21% [4], Nguyễn Khắc Minh (2009) ở miền Trang là 2,38% [2], 0,3% ở vùng cao nguyên Cao Thị Thu Ba (2006) [1], Lý Vãn Sơn (2008) ở Thừa Thiên Huế chỉ có 0,98% [3J. Một số nghiên cứu khác trên thể giới, ở Nigeria là 0,37% Omoregie và cộng sự (2010) [17]. Vieng Chan, Lào 3,7% [20], Pháp 3,1% (Lefrevre 1988) [ỉ 1]. Như vậy, kỹ thuật có độ nhạy cao để xác định trường hợp đã và đang nhiễm T. vaginalis là cần thiết. 433
- 4.3. Tỷ lệ mang kháng thể IgG kháng T. vaginalis bằng kỹ thuật ELISA Bảng 5 cho thấy tỷ lệ người mang kháng thể kháng T. vaginalis cao hơn hẳn so vói kết quả xét nghiệm trực tiếp. Mặt khác cũng có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê về tỷ lệ mang kháng thể giữa các nhóm: Phụ nữ có triệu chứng so với phụ nữ không có triệu chứng, t nh dục không an toàn so với t nh dục an toàn. Dữ ỉiệu này cho thấy, huyểt thanh dịch tễ cho kết quả tương ứng với xét nghiệm trực tiếp, nhưng có độ nhạy cao hơn kỹ thuật ELISA hữu ích trong tầm soát dịch tễ học trong cộng đồng. Huyét thanh chẩn đoán còn phát hiện 8,7% nam có kháng thể kháng T. vaginalis so với nữ 18 9%. Tuy nhiên, sự khác biệt này không có ý nghĩa thống kê có lẽ ià do số ỉượng còn ít. Kết quả này lần đầu tiên được báo cáo ở Việt Nam cho thấy nhiễm T. vaginalis ở nam giới chủ yếu là không triệu chứng và là nguồn lây bệnh rât quan trọng. Hơn nữa, nghiên cứu của Stark JR và c s (2009) [0], Yusof AM và c s (2012) [25] cho thấy có sự ỉiên quan giữa nhiễm T. vaginalis với ung thư cổ tử cung và ung thư tiền liệt tuyến. V. KÉT LUẬN Từ kết quả nghiên cứu trên chúng tôi rút ra những kết luận sau Kỹ thuật ELISA phát hiện kháng thể kháng T. vaginalis có độ nhạy 93,48%, độ đặc hiệu 84 88%. Kỹ thuật này rất hữu ích trong việc điều ưa dịch tễ học nhiễm T. vagìnaỉỉs âm đạo nhằm xác định nhóm nguy cơ nhiêm STD góp phần trong công tác phòng chống bệnh xã hội. So sánh tỷ ĩệ nhiễm T. vaginalis và tỷ lệ mang kháng thể kháng T. vaginalis: •f Tỷ lệ nhiễm r. vaginalis dựa vào kết quả xét nghiệm trực tiếp: 19,3% ở nhóm phụ nữ có triệu chứng và 0,7% ở nhóm phụ nữ không có triệu chứng. •ỉ Tỷ ỉệ mang kháng thể kháng T. vaginalis cao hơn tỷ lệ nhiễm r. vaginalis: 31,3% ở nhóm phụ nữ có triệu chửng và 13,3% ở nhóm phụ nữ không có triệu chứng. + Không có sự khác biệt giữa tỷ lệ mang kháng thể kháng T. Vaginalis ở nhóm phụ nữ 18,9% so với ở nam giới 8,7%. + Ket quả huyet thanh miên dịch có độ nhạy cao hơn và cho kết quả tương đương với xét nghiệm trực tiếp ở các phân nhóm nghiên cửu. TÀ I LIỆU THAM KHẢO 1. Cao Thị Thu Ba. Tỷ lệ viêm nhiễm đường sinh dục dưới ờ phụ nữ dân tộc thiểu số người Cill tại Huyên Lac Dương, tỉnh Lâm Đồng, Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 2006, 10:85 89. 2. Nguyên Khãc Minh, Đinh Thanh Huề, Cao Ngọc Thành. Tần suẩt viêm nhiễm đường sinh dục dưới tại huyên Tuyên Phước, tinh Quảng Nam. Tạp chí Y học thực hành, 2009, 15:117 121. ^ 3. Lý Văn Sơn.T nh h nh viêm nhiễm đường sinh đục dưới ở phụ nữ đến khám tại Trung tâm phòng chống bệnh xã hội tỉnh Thừa Thiên Huế, Luận văn Thạc sĩ Y học, Trường Đại học Y Dược Huế 2008. 4. Lê Văn Tề, Đinh Thanh Huề.Tỷ lệ viêm nhiễm đường sinh dục dưới ở Huyện Quảng Trạch, tỉnh Quảng B nh Tao chí Y học thực hành, 2004, 3:65 67. 5. Addis MF, Rappelli p Andrade AMP, Rita FM, Colombo MM, Cappuccineili p, and Fiori PL. Identification of Trichomonas vaginalis aActinin as the Most Common Immunogen Recognized by Sera of Women Exposed to the Parasite, The Journal of Infectious Diseases 1999;180:172730. 6. A*derete Jp> Kasmala. Monoclonal Antibody to a Major Glycoprotein Immunogen Mediates Differential ComplementIndependent Lysis of Trichomonas vaginalis, Infect Immun. 1986 Sep53(3)‘6979 7. Centers for Disease Control and Prevention (CDC), Contraceptive practices before and after an intervention promoting condom use to prevent HIV infection and other sexually transmitted diseases among women selected u .s sites, 1993 1995, MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 1997 May 246(17)3737 434
- 8. Carr PL, Felsenstein D, Friedman RH. Evaluation and management of vaginitis, JGIM volume 13, May, 1998, p.335346. v 9. Dailey DC, Alderete JF. The Phenotypicaliy Variable Surface Protein of Trichomonas vaginalis Has a Single, Tandemly Repeated Immunodominant Epitope,Infect Immun. 1991 Jun; 59 (6): 20838. 10. Fernando SD, Herath s, Rodrigo c, Rajapakse s. Improving diagnosis of Trichomonas vaginalis infection in resource limited health care settings in Sri Lanka, J Glob Infect Dis. 2011 Oct;3(4):3248. 11. Lefevre JC, Averous s, Bauriaud R, Blanc c , Bertrand MA, Lareng MB, Lower genital tract infections in women: comparison of clinical and epidemiologic findings with microbiology,Sex Transm Dis. 1988 AprJun; 15(2):1103. 12. Loo SK, Tang WY, Lo KK, Clinical significance of Trichomonas vaginalis detected in Papanicolaou smear: a survey in female Social Hygiene Clinic, Hong Kong Med J 2009;15:903. 13. Mason PR, Super H, Fripp PJ, Comparison of four techniques for the routine diagnosis of Trichomonas vaginalis infection., J Clin Pathol. 1976 February; 29(2): 154157. 14. Mason PR, Gregson s, Gwanzura L, Cappuccineỉii p, Rapelli p, Fiori PL, Enzyme immunoassay for urogenital trichomoniasis as a marker of unsafe sexual behavior, Epidemiol. Infect. (2001), 126, 103±109 15. Mason PR, Serodiagnosis of Trichomonas vaginalis infection by the indirect fluorescent antibody test. J. Clin Pathol. 1979.32:12111215 16. McCann J. s. 1974. Comparison of direct microscopy and culture in the diagnosis of trichomoniasis. Br. J. Vener. Dis. 50:450452. 17. Omoregie R, Prevalence and etiologic agents of female reproductive Iract infection among inpatients and out patients of a tertiary hospital in Benin city, Nigeria, N Am J Med Sci. 2010 Oct;2(10):4737. 18. Senna AC, Miller w c , Hobbs MM, Schwebke JR, Leone PA, Swygard H, Atashili J, and Cohen MS Trichomonas vaginalis Infection in Male Sexual Partners: Implications for Diagnosis, Treatment, and Prevention Clinical Infectious Diseases 2007; 44:1322. 19. Sherrard J, Donders G, White Đ, Jensen JS; European IUSTI, European (IUSTI/WHO) guideline on the management of vaginal discharge, 2011, International Journal of STD & AIDS 2011; 22: 421429. 20. Sihavong A, Phouthavane T, Lundborg c s , Sayabounthavong K, Syhakhang L, Wahlstrom R, Reproductive tract infections among women attending a gynecology outpatient department in Vientiane, Lao PĐR., Sex Transm Dis 2007 Oct;34(10):79l5. 21. Stark JR, Judson G, Alderete JF, Mundodi V, Kucknoor AS, Giovannucci EL, Platz EA, Sutcliffe s Fall K Kurth T, Ma J, Stampfer Ml, Mucci LA., Prospective study of Trichomonas vaginalis infection and prostate cancer incidence and mortality: Physicians’ Health Study., J Natl Cancer Inst. 2009 Oct 21;10ỉ(20):1406ll 22. Thurman AR, Doncel GF, Innate immunity and inflammatory response to Trichomonas vaginalis and bacterial vaginosis: relationship to HIV acquisition, Am J Reprod Immunol. 2011 Feb;65(2):8998 23. World Health Organization Prevalence and incidence of selected sexually transmitted infections, Chlamydia trachomatis Neisseria gonorrhoeae, syphilis and Trichomonas vaginalis: methods and results used by WHO to generate 2005 estimates Geneva: the Organization; 2011. [cited 2012 Jan 31]. eng pdf 24. Warner L, Newman DR, Austin HD Kamb ML, Douglas JM Jr, Malotte CK, Zenilman JM, Rogers J, Bolan G Fishbein M, Kleinbaum DG, Macaluso Mf Peterman TA, Condom effectiveness for reducing transmission of gononhea and chlamydia: the importance of assessing partner infection siatus, Am J Epidemiol 2004 Feb M 59(3)'24251 35. Yusof AM, Kumar s., Phenotypic Variant’ forms of Trichomonas vaginalis trophozoites from cervical neoplasia patients. Exp Parasitol. 2012 Jul;131(3):26773. / 435
