Các xét nghiệm - Các dấu ấn không xâm lấn đánh giá chức năng gan - Xơ hóa gan

Nội dung text: Các xét nghiệm - Các dấu ấn không xâm lấn đánh giá chức năng gan - Xơ hóa gan

1. 1 Các xét nghiệm - Các dấu ấn không xâm lấn đánh giá chức năng gan-xơ hóa gan Các khái niệm chính • Các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm là các test không xâm lấn đánh giá: rối loạn chức năng, theo dõi bệnh gan đã biết, xác định mức độ nghiêm trọng của bệnh xơ gan và đánh giá đáp ứng với điều trị. • Các xét nghiệm thường được sử dụng nhất bao gồm aminotransferase huyết thanh, bilirubin, phosphatase kiềm, albumin và thời gian prothrombin. • Aminotransferase huyết thanh tăng cao biểu thị tình trạng tổn thương tế bào gan, và mức tăng phosphatase kiềm và bilirubin cho thấy tổn thương gan do ứ mật. • Các xét nghiệm này có thể giúp xác định các trạng thái bệnh cụ thể . • Các dấu ấn sinh học không xâm lấn của xơ hóa gan cho một đánh giá về xơ hóa gan và đã được chấp nhận trong bệnh viêm gan virus mãn tính. • Các dấu ấn sinh học không xâm lấn của xơ hóa gan bị hạn chế bởi các kết quả không xác định ở mức độ xơ hóa tế bào. • Sinh thiết gan tiếp tục là tiêu chuẩn vàng trong chẩn đoán và quản lý bệnh gan. • Sinh thiết gan qua da là một thủ thuật an toàn, tỷ lệ tử vong thấp. Tính an toàn của quy trình có thể được tăng cường khi bổ sung hướng dẫn siêu âm. * Siêu âm nội soi sinh thiết xuyên dạ dày là một kỹ thuật mới có thể mang lại những lõi mô gan lớn và có thêm ưu điểm của nội soi chẩn đoán đường trên. • Nội soi ổ bụng chẩn đoán cho phép bác sĩ lâm sàng khả năng quan sát hình dạng tổng thể của gan, thực hiện sinh thiết theo chỉ định và lấy mô phúc mạc khi được chỉ định. I.Giới thiệu Đánh giá cận lâm sàng của hệ thống gan mật có một vai trò quan trọng trong việc chẩn đoán, theo dõi và đánh giá bệnh nhân mắc bệnh gan mật. Các hướng dẫn do Học viện Hóa sinh Lâm sàng Quốc gia (NCAB) và Hiệp hội Nghiên cứu Bệnh gan Hoa Kỳ (AASLD) đã khuyến cáo rằng các xét nghiệm sau được sử dụng để đánh giá bệnh nhân đã biết hoặc nghi ngờ mắc bệnh gan: aspartate aminotrans-ferase ( AST), alanin aminotransferase (ALT), phosphatase kiềm (ALP), bilirubin toàn phần, bilirubin trực tiếp, protein và albumin (ALB). Một cuộc khảo sát trên 10 bệnh viện công và 13 mạng lưới phòng thí nghiệm tư nhân ở Úc và New Zealand đã xác định những xét nghiệm sau như một phần của hồ sơ xét nghiệm chức năng gan: ALP, ALT, AST, glutamyltransferase (GGT), ALB, protein toàn phần, bilirubin toàn phần và globulin [2]. Một nhóm của tất cả các thử nghiệm này được sự chấp thuận của Ban quản trị tài chính chăm sóc sức khỏe để hoàn trả cho Medicare [1]. Do đó, một số xét nghiệm máu hạn chế
2. 2 được coi là "xét nghiệm gan cổ điển" và bao gồm các hoạt động men huyết thanh ALT, AST, ALP, nồng độ bilirubin toàn phần và ALB [3]. Hoạt động của men gan trong huyết thanh có thể được chia thành các dấu hiệu của tổn thương tế bào gan (ALT và AST) và ứ mật (phosphatase kiềm và bilirubin huyết thanh cô đặc). Chúng không thực sự đo lường chức năng gan và là những thước đo sinh hóa về tổn thương gan hoặc tình trạng ứ mật. Các xét nghiệm máu khác thường được sử dụng để đánh giá chức năng gan bao gồm ALB huyết thanh và thời gian prothrombin (PT) và phản ánh chức năng tổng hợp của gan. Các xét nghiệm gan cung cấp cho các nhà cung cấp dịch vụ chăm sóc sức khỏe một phương pháp không xâm lấn để sàng lọc sự hiện diện và theo dõi quá trình tổn thương gan. Không có một xét nghiệm gan nào cho phép bác sĩ lâm sàng đánh giá chính xác toàn bộ chức năng của gan. Các thử nghiệm trong phòng thí nghiệm này chỉ đo lường một số chức năng của gan. Ngoài ra, chúng ngày càng được sử dụng để điều tra các cá thể không có triệu chứng hoặc những người có các triệu chứng không đặc hiệu. Các xét nghiệm chức năng gan (LFTs) biệt lập ở những người không có triệu chứng đang ngày càng trở thành một phương pháp được công nhận rộng rãi đối với các bác sĩ lâm sàng do việc kết hợp thường xuyên các xét nghiệm gan trong bảng hóa học máu tự động. Xét nghiệm gan cũng được sử dụng một mình hoặc kết hợp với các thông số lâm sàng để đánh giá mức độ nghiêm trọng của rối loạn chức năng gan. Nhiều mô hình dự đoán để xác định tiên lượng của từng bệnh nhân, bao gồm điểm Child-Pugh (CP) cho bệnh xơ gan, chức năng phân biệt của Maddrey (DF) đối với bệnh viêm gan do rượu và mô hình cho điểm bệnh gan giai đoạn cuối (MELD) để tiên lượng và ưu tiên các ứng cử viên ghép gan, dựa trên đánh giá của các xét nghiệm gan khác nhau như thời gian prothrombin, bilirubin huyết thanh và albumin 14-6j. Ngoài ra, các đánh giá xét nghiệm gan nối tiếp được sử dụng để theo dõi đáp ứng điều trị ở những bệnh nhân mắc bệnh gan đã biết, chẳng hạn như trường hợp điều trị viêm gan tự miễn và viêm đường mật nguyên phát. II.Các xét nghiệm dùng để phát hiện tổn thương tế bào gan 1.Aminotransferase: Hoạt động của aminotransferase huyết thanh (AST và ALT) trong gan cao hơn -7000- và 3000 lần so với các hoạt động huyết thanh, và chúng là những chỉ số nhạy cảm của tổn thương tế bào gan. Cả ALT và AST đều có trong huyết thanh ở nồng độ thấp từ 30 - 40 IU / L. AST chủ yếu được tìm thấy trong tim, gan, cơ xương, thận, não, tuyến tụy, phổi, bạch cầu, và hồng cầu, trong khi ALT chủ yếu được tìm thấy ở gan và thận với số lượng ít hơn ở tim và cơ xương. ALT là dấu hiệu đặc hiệu cho tổn thương mô gan hơn AST [1,7]. ALT được tìm thấy đa số trong tế bào chất của tế bào trong khi AST có trong cả ti thể và tế bào chất. ALT và nồng độ AST trong mật rất thấp và hầu
3. 3 như không tồn tại trong nước tiểu và người ta tin rằng các enzym được đào thải khỏi máu bởi hệ thống lưới nội mô. Các enzym này xúc tác việc chuyển các nhóm amino từ aspartat và alanin sang nhóm alpha keto của axit ketoglutaric để tạo ra axit oxalacetic và pyruvic, là những chất góp phần quan trọng vào chu trình axit xitric. Cả AST và ALT đều cần pyridoxa1-5'- phosphate (P-5'-P) để có hoạt động tối đa, và sự thiếu hụt P-5'-P ảnh hưởng đến ALT lớn hơn AST. Phương pháp cụ thể nhất để đo hoạt tính ALT và AST trong huyết thanh dựa trên sự hình thành axit pyruvic và axit oxaloacetic, sản phẩm của aminotransferase, và kết hợp với lactate và maleate, một phản ứng dẫn đến việc giảm nicotinamide adenine dinucleotide bị oxy hóa (NADH ). Hình 1: Tuổi và giới tính ảnh hưởng đến giới hạn trên của ALT bình thường (hình tròn: nam; hình vuông: nữ) Để giảm nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) .NADH có thể hấp thụ ánh sáng ở bước sóng 340 nm và do đó sự mất khả năng hấp thụ, được đo bằng phương pháp quang phổ, mang lại kết quả có thể đo được. Giới hạn trên của bình thường (ULN) hiện tại đối với ALT và AST thường được đặt ở khoảng 40 IU / L bởi hầu hết các phòng thí nghiệm, mặc dù có sự khác biệt nhỏ giữa các phòng thí nghiệm khác nhau. AST cao hơn ALT ở trẻ em cho đến khoảng 15 tuổi ở nam và 20 tuổi ở nữ. Ở người lớn, hoạt động ALT cao hơn hoạt động AST và cả hai đều cao hơn ở nam so với nữ. Ở khoảng 60 tuổi hoạt động của AST và ALT là ngang nhau mà không có sự khác biệt về giới tính (Hình .1). Vì các tham chiếu giới hạn trên khác nhau rất ít giữa độ tuổi 25 và 60, nên không cần giới hạn tham chiếu được điều chỉnh theo độ tuổi trong dân số này. Tuy nhiên, các giới hạn điều chỉnh riêng biệt là cần thiết cho trẻ em và người lớn tuổi [8].
4. 4 ULN hiện tại được tính toán vào những năm 1980 khi xét nghiệm ALT được giới thiệu như một dấu hiệu đại diện để sàng lọc bệnh viêm gan không phải A, không phải B ở những người hiến máu. Như với hầu hết các xét nghiệm cận lâm sàng, phạm vi bình thường là giá trị trung bình của một "nhóm người khỏe mạnh" ± 2 SD (phân vị thứ 97,5) [9]. Tham chiếu ULN được thiết lập trước khi có xét nghiệm viêm gan C và "dân số khỏe mạnh" có thể cũng bao gồm một số bệnh nhân mắc bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu (NAFLD). Trước đây đã có nhiều ULN cho ALT với mức độ thay đổi gấp hai lần giữa các phòng thí nghiệm. Lý do cho sự thay đổi được đánh dấu bao gồm việc sử dụng các phòng thí nghiệm khác nhau. Tuy nhiên, không cần nhấn mạnh rằng có nhiều sự khác biệt giữa các phòng thí nghiệm hơn là giữa các máy phân tích, và các quần thể tham chiếu mà từ đó ULN được xác định thường có đặc điểm kém và có thể bao gồm những người bị bệnh gan [10]. Một nghiên cứu đa trung tâm thấy rất nhỏ sự khác biệt, giữa ba kiểu máy phân tích tự động cho một mẫu tham chiếu có hoạt độ ALT là 39,71U / L. Vì vậy, sự khác biệt trong quy trình phòng thí nghiệm chỉ giải thích một phần sự khác biệt về giới hạn chuẩn giữa các phòng thí nghiệm. Trong một nghiên cứu riêng biệt về các trung tâm học thuật 11 được sử dụng bởi Nghiên cứu lâm sàng bệnh viêm gan nhiễm mỡ do nghiện rượu Nehvork (NASH CRN), các yếu tố chính được xác định trong sự biến đổi của ALT ULN được cho là do các đặc điểm khác nhau của nhóm tham chiếu được sử dụng bởi các chuyên gia xét nghiệm để xác định tham chiếu của riêng họ thay vì biến thể phân tích nội bộ [10,11] Ngoài ra, mức aminotransferase sẽ dao động theo thời gian. Trong một nghiên cứu trên 1364 người có hai lần đánh giá ALT và AST, trung bình cách nhau 18 ngày, khoảng một phần ba số người có ALT hoặc AST bất thường ban đầu được phân loại lại là có xét nghiệm bình thường khi theo dõi [12]. Điều này đã khiến một số người đặt câu hỏi về tính hợp lệ của ULN đối với các aminotransferase huyết thanh. Piton và cộng sự chứng minh rằng ALT có liên quan độc lập với giới tính nam và chỉ số khối cơ thể (BMI) và hai yếu tố này chiếm 22% sự thay đổi ALT [13]. Họ đề xuất rằng ULN trong thực hành lâm sàng và nghiên cứu lâm sàng nên được xác định lại dựa trên giới tính và BMI . Tương tự, một nghiên cứu hồi cứu về những người hiến máu ở Ý đã tính toán ALT ULN trong nhóm bệnh nhân có nguy cơ mắc bệnh cận lâm sàng thấp nhất bằng cách phân tầng bệnh nhân có BMI bình thường (<25 kg / m2); triglycerides huyết thanh bình thường (<200 mg / dL), cholesterol (<22 mg / c11.), glucose (<105 mg / dL) và không có sử dụng thuốc đồng thời đến 30 IU / L cho nam và 19IU / L cho nữ [9]. Các tác giả đưa ra giả thuyết rằng nhiễm virus viêm gan C (HCV) chưa được chẩn đoán đã đóng một vai trò quan trọng trong việc đánh giá quá cao ngưỡng ALT đối với bệnh gan trước đây. Để xác
5. 5 định ALT ULN giúp phân biệt những người nhiễm HCV viêm gan với những người có nguy cơ mắc bệnh gan thấp nhất, Ruht và Cộng sự đã sử dụng dữ liệu Khảo sát Kiểm tra Sức khỏe và Dinh dưỡng Quốc gia (NHANFS) được thu thập từ năm 1999 đến 2008 để xác định các cá nhân không có HCV và có nguy cơ mắc bệnh gan thấp nhất bằng cách loại trừ những người có vi rút viêm gan B (HBV), tiểu đường, uống rượu và béo phì và xác định rằng ALT ULN là 29 IU / L đối với nam và 22 IU / l đối với nữ [10]. Ngoài việc xác định ULN cho ALT để xác định sự hiện diện hay không có bệnh gan, sự gia tăng ALT huyết thanh có liên quan đến kết quả kém. Trong một nghiên cứu dựa trên dân số lớn từ Hàn Quốc, hoạt tính ALT huyết thanh được đo tại thời điểm ban đầu có tương quan với tỷ lệ tử vong sau đó. Tỷ lệ tử vong liên quan đến gan tăng gấp 2,9 lần đối với những người đàn ông có ALT 20-291U / L. và tỷ lệ tử vong tăng 9,5 lần ở những người có ALT 30-391U / l khi so sánh với những người đàn ông có ALT <201U / L. Ở những bệnh nhân bị bệnh gan, ALT và AST được giải phóng từ tế bào gan vào huyết thanh, làm tăng nồng độ. Chẩn đoán phân biệt giữa ALT và AST tăng cao rất rộng và bao gồm các rối loạn như viêm gan cấp tính và mãn tính (do virus, thiếu máu cục bộ, do thuốc và độc tố gây ra), xơ gan do mọi nguyên nhân, suy tim và tắc nghẽn đường ra tĩnh mạch, bệnh u hạt, thâm nhiễm ác tính và tắc mật . Tăng ALT và AST là một trong những bất thường đầu tiên trong phòng thí nghiệm ở bệnh nhân viêm gan cấp tính. Ở những bệnh nhân bị vàng da do hậu quả của tổn thương gan, sự gia tăng bilirubin thường xảy ra khoảng 1 tuần sau khi ALT và AST tăng lần đầu. Mức độ tăng ALT và AST có thể cung cấp một số thông tin chi tiết về căn nguyên của tổn thương gan. Tăng ALT và AST đến giá trị> 15 lần ULN thường thấy trong bệnh viêm gan cấp tính do nhiễm virus, viêm gan do thuốc hoặc độc tố gây ra (ngộ độc acetaminophen, ngộ độc do ăn phải phaloides Amanita), viêm gan tự miễn, viêm gan do thiếu máu cục bộ (hoặc các biến cố mạch máu khác như hội chứng Budd-Chiari hoặc hội chứng tắc nghẽn sinusoidal (SOS), hội chứng HELLP (tán huyết, tăng men gan và số lượng tiểu cầu thấp) và gan nhiễm mỡ do thai nghén. ALT và AST tăng vừa phải đến giá trị> 6 <15 lần ULN gặp ở những bệnh nhân bị bệnh gan mãn tính như viêm gan siêu vi mãn tính, tắc nghẽn gan do suy tim, bệnh Wilson và một số trường hợp viêm gan tự miễn. Tăng nhẹ ALT và AST <6 ULN thường thấy ở những bệnh nhân bị viêm gan do rượu, viêm gan không do rượu, bệnh huyết sắc tố, viêm gan siêu vi mãn tính, xơ gan Hiếm có trường hợp tắc nghẽn ống mật cấp tính do sỏi chèn ép ở đầu dưới của ống mật chủ, trong đó ALT và AST có thể tăng lên> 15 ULN.
6. 6 Trong hầu hết các dạng bệnh gan, ALT cao hơn AST, nhưng có một số trường hợp khi AST cao hơn ALT. AST huyết thanh thường tăng lên mức 2-6 lần ULN trong viêm gan do rượu nặng. Ở 70% bệnh nhân viêm gan do rượu, tỷ lệ AST: ALT cao hơn 2 và tỷ lệ> 3 gợi ý nhiều đến bệnh gan do rượu [14]. Tỷ lệ AST trên ALT tăng này có thể liên quan đến sự thiếu hụt P-5'-P ở bệnh nhân mắc bệnh gan do rượu. P-5'-P là thành phần cần thiết trong quá trình tổng hợp ALT và sự thiếu hụt có thể dẫn đến mức ALT thấp hơn. Ngoài ra, các nhà nghiên cứu đã xác định được sự hiện diện của phức hợp AST-immunoglobulin (Ig) (macro- AST) ở những bệnh nhân bị bệnh gan mãn tính. Sự hiện diện của phức hợp AST-IgA thường thấy ở những bệnh nhân bị bệnh gan do rượu hơn là ở những người bị viêm gan mãn tính và xơ gan, cho thấy rằng phức hợp AST-IgA có thể giải thích cho tỷ lệ ALT: AST đảo ngược trong viêm gan do rượu [15]. Tăng AST và ALT cũng có thể được nhìn thấy trong các bệnh khác ngoài bệnh gan. AST tăng cao ở những bệnh nhân bị nhồi máu cơ tim và những người bị chấn thương cơ đáng kể như viêm cơ, tiêu cơ vân, hoặc sau khi vận động mạnh. Thông thường AST lớn hơn ALT với tỷ lệ 3: 1 nhưng điều này tiến tới 1: 1 theo thời gian vì AST có thời gian bán hủy ngắn hơn ALT. 2.Glutamate dehydrogenase Glutamate dehydrogenase có trong gan, tim, cơ và thận. Nó là một loại enzyme ty thể xúc tác quá trình khử amin thuận nghịch của glutamate thành alpha- ketoglutarate cộng với amoniac tự do bằng cách sử dụng NAD hoặc NADP làm đồng yếu tố. Nó chủ yếu được tìm thấy trong tế bào gan trung tâm và đã được nghiên cứu như một dấu hiệu của tổn thương gan cũng như tổn thương ty thể ở những bệnh nhân ngộ độc acetaminophen cấp tính, nơi nó hoạt động tốt hơn ALT ban đầu trong việc dự đoán tổn thương gan cấp tính. Nó không được sử dụng thường xuyên trong thực hành lâm sàng. 3.Isocitrate dehydrogenase Isocitrate dehydrogenase là một enzym tế bào chất có trong gan, tim, thận và cơ xương. Tăng hoạt tính isocitrate dehydrogenase trong huyết thanh được thấy ở những bệnh nhân bị tổn thương gan cấp tính và mãn tính, bệnh ác tính lan tỏa mà không liên quan đến gan. Các đột biến soma dị hợp tử trong gen ICDH1 và ICDH2 có liên quan đến một số loại khối u khác nhau, bao gồm cả ung thư biểu mô đường mật trong gan. Đo hoạt tính isocitrate dehydrogenase trong huyết thanh không mang lại bất kỳ ưu điểm chẩn đoán nào so với hoạt tính của aminotransferase và nó không được sử dụng thường quy trong thực hành lâm sàng. 4.Lactate dehydrogenase
7. 7 Lactate dehydrogenase {LDH} là một enzyme tế bào chất phổ biến ở khắp mọi nơi. Có năm isoenzyme có thể đo được bằng điện di. LDH xúc tác thuận nghịch cho quá trình chuyển đổi Lactate và NAD thành pyruvate và NADH. Hoạt độ LDH huyết thanh rất cao ở bệnh nhân viêm gan do thiếu máu cục bộ và tỷ lệ ALT / LDH là 1,5 giúp phân biệt viêm gan virus với viêm gan do thiếu máu cục bộ, độ đặc hiệu là 84% [16-18]. III.Enzyme để phát hiện ứ mật 1.Phosphatase kiềm Thuật ngữ cholestasis có nguồn gốc từ tiếng Hy Lạp chole, có nghĩa là mật, và ứ có nghĩa là đứng yên. Ứ mật xảy ra do khiếm khuyết trong tổng hợp mật, bài tiết mật hoặc do tắc nghẽn dòng chảy của mật [19}. Hoạt động ALP huyết thanh là dấu hiệu gián tiếp truyền thống của tình trạng ứ mật. Các enzym khác phản ánh tình trạng ứ mật bao gồm 5'-nucleotidase và Ƴ-glutarnyltransferase (GGT). ALP và 5'-nucleotidase được tìm thấy trong màng ống mật trong khi GGT nằm trong lưới nội chất và tế bào biểu mô ống mật. ALP của con người có thể được phân loại thành ít nhất bốn isoenzyme cụ thể của mô tùy theo tính chất cụ thể của mô. Đó là ALP nhau thai (hoặc Regan isoenzyme), ALP ruột, ALP gan / xương / thận và ALP tế bào mầm. Các enzym có thể phân biệt được bằng nhiều phương pháp cấu trúc, sinh hóa và miễn dịch học. Hoạt động ALP trong huyết thanh chủ yếu bắt nguồn từ màng ống tủy của tế bào gan, nguyên bào xương, đường viền bàn chải của tế bào biểu mô ruột, nhau thai 3 tháng đầu và các ống lượn gần của thận [20]. Người ta biết rất ít về chức năng của ALP trong hầu hết các mô. Sự phân bố của enzym trong huyết thanh thay đổi theo tuổi. Phạm vi huyết thanh bình thường là 20-140 IU / L. Ở trẻ em, mức độ hoạt động ALP trong huyết thanh cao gấp 3 lần so với mức độ hoạt động ở người trẻ và tương quan với sự phát triển của xương. ALP của xương chiếm khoảng một nửa tổng số ALP hoạt động ở người lớn. Ở nhóm tuổi từ 15 đến 50, ALP trung bình ở nam cao hơn ở nữ. Ở những người trên 60 tuổi, hoạt động của enzym cao hơn ở phụ nữ và có thể gấp 1,5 lần ở người trẻ (Hình 2). Ngoài ra, hoạt tính ALP cũng tăng đáng kể vào cuối thai kỳ, đạt tới 3-4 lần giá trị bình thường, do sự gia tăng của phosphatase nhau thai [21]. Sự gia tăng hoạt động ALP huyết thanh do dòng ALP trong ruột cũng có thể được nhìn thấy sau khi ăn các bữa ăn nhiều chất béo ở những bệnh nhân có nhóm máu O và B. Mức tăng ALP không hoàn toàn đặc biệt cho tình trạng ứ mật, và mức tăng nhẹ (2-3 lần ULN) có thể gặp ở hầu hết mọi loại bệnh gan. Tăng hoạt tính ALP lớn
8. 8 hơn 4 lần ULN được thấy ở những bệnh nhân bị bệnh gan ứ mật, gan bị thâm nhiễm và nhanh chóng tạo loãng xương. Hình 2 Tác động của tuổi và giới tính trên giới hạn trên bình thường của ALP (hình tròn, nam, hình vuông, nữ) ( copy lại từ (1) với sự cho phép của Hiệp hội Hóa lâm sàng Mỹ Trong thực hành lâm sàng, sự phân biệt nguyên nhân của sự gia tăng ALP được xác định bằng cách thực hiện xét nghiệm enzym tăng dần với 5'nuthotidase hoặc GCT. bằng cách đo isoenzyme bằng điện di. Hoặc bằng cách cho ALP bất hoạt hóa học hoặc nhiệt. Kết quả đo ALP huyết thanh tăng cao với một phần ổn định lành cho thấy rằng ALP là từ nhau thai hoặc một khối u. Tuy nhiên, phương pháp thứ hai này hiếm khi được sử dụng trong thực hành lâm sàng ngày nay. Chỉ có ALP gan được tìm thấy trong huyết thanh của bệnh nhân bị bệnh gan. Cơ chế mà bệnh gan dẫn đến sự gia tăng hoạt động huyết thanh của ALP có liên quan đến việc tổng hợp ALP trong gan và sự trào ngược vào máu sinusoidal [21]. Phương thức mà ALP đạt đến huyết thanh vẫn chưa rõ ràng nhưng nó Có thể xảy ra do solubtlizatIon của các enzym liên kết màng gan bởi các axit mật [22]. Tăng ALP xảy ra trong bối cảnh của cả bệnh ứ mật trong và ngoài gan và mức độ hoạt động ALP huyết thanh không giúp phân biệt giữa hai thực thể này. Hoạt tính huyết thanh của ALP tương tự trong tình trạng ứ mật trong gan do viêm gan do thuốc, viêm gan do virus, viêm đường mật nguyên phát, bệnh gan u hạt, hoặc xơ cứng chính ống dẫn nhỏ và trong bệnh ứ mật ngoài gan do ung thư tuyến tụy, sỏi đường mật, xơ cứng ống dẫn lớn- viêm đường mật, hoặc tắc nghẽn ống mật / gan chung. Các bệnh lý không do gan khác, chẳng hạn như: Ung thư ngoài gan, suy tim sung huyết, nhồi máu vùng bụng dưới, viêm tủy xương, cường giáp và bệnh viêm ruột, có thể dẫn đến tăng ALP
9. 9 2. 5'-Nudeotidase 5 '- Nudeotidase được tìm thấy trong gan, ruột non, não, tim, mạch máu và tụy. Trong gan, enzyme liên kết với ống mật [ bile canalicular] và sinusoidal membrane, nơi nó xúc tác sự thủy phân của các nucleotide như adenosine 5 'phosphate và inosin 5-phosphate. Nó cũng đã được tìm thấy trong tế bào chất. Nó thường hiện diện ở nồng độ thấp trong thời thơ ấu và tăng lên ở tuổi thiếu niên, đạt đến mức cao ở tuổi 50. Mặc dù sự lan rộng phổ biến ở giai đoạn đầu. Trong cơ thể sự gia tăng nồng độ 5’-nucleotidase trong huyết thanh khiến bệnh nhân bị ứ mật tương tự như hoạt động ALP. Axit mật có tác dụng như các detergant có khả năng gây colubilife và phá vỡ màng ống mật giải phóng ALP và 5'-nucleolidase được phản ánh trong sự gia tăng song song các enzym này trong huyết thanh của bệnh nhân bị bệnh gan ứ mật. Có rất ít hoặc không tăng 5’-nucleotidase ở những bệnh nhân bị bệnh xương và do đó xét nghiệm có thể được sử dụng để xác nhận nguồn gốc gan của ALP tăng cao ở những bệnh nhân nghi ngờ mắc bệnh gan. 3.Gamma-glutamyltransferase Gama Glutamyl transferase (GGT) trước đây được gọi là Gamma- glutarnyltrarepeptitlase nằm trên màng huyết tương của hầu hết các tế bào, bao gồm thận, tuyến tụy, lá lách, tim, não và túi tinh. nhưng chủ yếu được tìm thấy trong các tế bào gan trong mạng võng lưới nội mô. Vai trò đầu tiên của GGT là sự chuyển hóa ngoài tế bào của glutethione, chất chống oxy hóa chính trong tế bào động vật có vú. Nó có trong huyết thanh người và phạm vi tham chiếu tương tự nhau ở mọi lứa tuổi, nhưng có sự khác biệt về giới tính, với ULN cao hơn ở nam giới (51 IU / L) so với nữ (33 IU / L). Mức độ bình thường được nhìn thấy trong thời thơ ấu và trong thai kỳ. Tổn thương gan, ứ mật, tiêu thụ quá nhiều rượu, béo phì và việc sử dụng các loại thuốc bao gồm phrnytoin và phimobarbital dẫn đến làm tăng hoạt động huyết thanh của GGT do bài tiết vào tuần hoàn [23]. Các giá trị bất thường của GGT được thấy trong cùng một phổ của bệnh như ALP và 5’-nucleotidase. Lợi ích lâm sàng của xét nghiệm GGT là xác nhận tính đặc hiệu của gan về hoạt động ALP tăng cao và xác định khả năng uống quá nhiều rượu, vì hoạt tính huyết thanh của GGT tăng lên đáng kể ở những bệnh nhân bị viêm gan do rượu so với ALP [23]. Trong những năm gần đây, sự thay đổi trong hoạt động GGT có liên quan đến vòng eo BMI, hút thuốc, nhịp tim, huyết áp và nồng độ glucose, ferritin và triglyceride trong huyết thanh. Ngoài ra, hiện nay có bằng chứng dịch tễ học mạnh mẽ rằng GGT là một yếu tố nguy cơ tích cực và không phụ thuộc vào bệnh tim mạch (CVD) và tử vong do CVD. Mối liên quan giữa tăng hoạt động GGT và tăng nguy cơ bệnh mạch máu dường như giống nhau đối với các biến cố tim và mạch máu não như đột quỵ.
10. 10 Có khả năng mối liên quan này liên quan đến mối liên hệ cơ bản của GGT với bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu, bản thân nó là một yếu tố nguy cơ chính của CVD và thường liên quan đến hoạt động của GGT [24]. 4.Bilirubin Bilirubin, một sắc tố tetrapyrrole, là sản phẩm cuối cùng của quá trình thoái hóa heme. Khoảng 70-90% bilirubin có nguồn gốc từ sự phân huỷ hemoglobin trong các tế bào hồng cầu già [25]. Các nguồn khác của bilirubin bao gồm myoglobin, cytochromes, catalase, peroxidase và tryptophan pyrrolase. Bilirubin được tạo ra ở ngoại vi không tan trong nước và được vận chuyển đến gan trong huyết tương liên kết chặt chẽ với albumin. Những bước ban đầu dẫn đến sự hình thành bilirubin xảy ra trong các tế bào lưới nội mô, chủ yếu ở lá lách và gan. Chuyển bilirubin từ máu vào mật bao gồm bốn bước, bao gồm sự hấp thu tế bào gan, liên kết nội bào, liên hợp và a.Đo bilirubin huyết thanh Bilirubin được đo trong máu bằng (i) "phản ứng diazo", (ii) đo quang phổ trực tiếp, (iii) phương pháp oxy hóa, enzym và hóa học, (iv) sắc ký đồ lỏng hiệu năng cao (HPLC) và (v) phương pháp xuyên da . Các thuật ngữ bilirubin phản ứng trực tiếp và gián tiếp dựa trên phương pháp van den Bergh ban đầu để đo bilirubin không liên hợp [26]. Phương pháp này vẫn được sử dụng trong một số phòng thí nghiệm hóa học lâm sàng để xác định mức bilirubin huyết thanh. Trong thử nghiệm này, bilirubin phản ứng với thuốc thử diazo và tách thành hai azodipyrrole tương đối ổn định hấp thụ cực đại ở bước sóng 540nm. Phần trực tiếp là phần phản ứng với thuốc thử diazo trong 1 phút khi không có cồn [26]. Phần này cung cấp xác định gần đúng lượng bilirubin liên hợp trong huyết thanh. Tổng mức bilirubin trong huyết thanh là lượng phản ứng trong 30 phút sau khi thêm rượu. Phần gián tiếp là sự khác biệt giữa mức bilirubin toàn phần và trực tiếp, và cung cấp một ước tính về lượng bilirubin không liên hợp trong huyết thanh. Với phương pháp van den Bergh, nồng độ bilirubin bình thường trong huyết thanh thường nhỏ hơn 1 mg / dL (17µmol/L). Tổng nồng độ bilirubin trong huyết thanh là từ 0,2 đến 0,9 mg /dL (3,4-15,3µmol/L) ở 95% dân số khỏe mạnh và dưới 1mg /dL (17 µmol /L) ở 99%. Bilirubin phản ứng trực tiếp đánh giá quá cao nồng độ bilirubin liên hợp vì một phần bilirubin không liên hợp (khoảng 10- 15%) cũng tạo ra phản ứng van den Bergh trực tiếp [26]. Những tiến bộ trong phương pháp luận đã chỉ ra rằng phương pháp diazo không phản ánh chính xác giá trị của các ion phân đoạn phản ứng gián tiếp và trực tiếp của bilirubin, đặc biệt là ở nồng độ bilirubin toàn phần thấp trong huyết thanh